Стерилизация заготовок: Как стерилизовать банки с заготовками в кастрюле с водой: инструкция, советы

By alexxlab No comments

Содержание

Стерилизация банок в духовке: электрической, газовой, время стерилизации

С давних времен банки стерилизовали на пару. Это было долго, вызывало много неудобств и паровую завесу в кухне. Сегодня есть более простой и эффективный метод. Пустые банки или уже с заготовками, современные хозяюшки стерилизуют в газовых и электрических духовках. О том, как правильно проводится стерилизация банок в духовке, будет описано в этой статье.

Преимущества сухой стерилизации

Фото банок

Стерилизация банок на пару дает хороший результат. Однако она не всегда практична. Когда необходимо сделать много консервации, то трудно по одной баночке стерилизовать на кипящем чайнике или в кастрюлях, да и мультиварки не такие большие, чтобы в них вместилось сразу 7-15 емкостей. Необходимость и трудности парового метода помогли хозяюшкам открыть для себя все прелести сухой стерилизации в духовке.

  1. Эффективность. При стерилизации банок в духовке погибают все бактерии, которые могут навредить консервации. Так что со своей главной задачей духовка справляется.
  2. Сухость – банки после обработки всегда сухие, не нужно ждать пока они подсохнут. Их безопасно брать тряпочкой – они не выскользнут из рук, как часто бывает при обработке паром.

Важно!

В горячие банки можно закладывать исключительно горячие заготовки. Если же заготовка холодная, то и кладут ее в холодную банку!

  1. Банки при нагреве в духовке очень редко бьются, если делать все правильно, и если изначально они были целыми.
  2. Сухая обработка банок очень простой и безопасный метод. Ожоги получить довольно трудно в данном случае, ведь пара нет, как и горячей посуды, для стерилизации – это не опасней, чем достать из духовки готовый пирог.
  3. Стерилизация банок в духовке позволяет избежать духоты в помещении, как в случае с паровой обработкой.

Правила стерилизации банок в духовке

Ознакомьтесь также с этими статьями

Как правильно стерилизовать банки в духовке

В разных случаях можно стерилизовать банки с заготовками или без них. Но, чтобы процедура была безопасной, нужно придерживаться определенных правил.

  • Пустые банки стерилизуют сразу перед закладкой заготовок. Делать это за несколько дней или за несколько часов до этого нецелесообразно. Ведь даже за короткое время в банку могут попасть вредные микробы.
  • Духовка перед использованием чистится. Если она будет грязной, то банки впитают разные запахи. Но чистить духовку нужно просто водой, можно с использованием уксуса (он быстро выветривается). От порошковых или жидких химических препаратов лучше отказаться в данном случае!
  • Банки в духовом шкафу расставляют в свободном порядке – они не должны соприкасаться, ведь если одна банка треснет, стоящая вплотную к ней тоже может стать непригодной к использованию.

Важно!

Если в небольшую духовку не становится трехлитровая банка, можно положить ее на бок. Для емкости это вполне безопасно.

  • При резкой смене температур банки обычно лопаются. Так что они ставятся всегда в холодную духовку, а не разогретую, а после того, как стерилизация завершится необходимо дать емкостям немного остыть, прежде чем вынимать.
  • После закладки банок в духовку стоит установить таймер. Если его нет на духовке, то можно поставить на телефоне, часах. Делается это для того, чтобы стерилизация длилась лишь определенное время. Если банки передержать они могут лопнуть, а если не додержать, то не все бактерии будут уничтожены.
  • Во избежание ожогов необходимо использовать прихватки, чтобы достать банки из духовки.
  • Желательно избегать попадания холодной воды на стерилизованные, сухие банки, потому как они от этого могут лопнуть.
  • Берут горячие банки аккуратно, двумя руками. Если взять за горлышко одной рукой, можно занести внутрь бактерии, от которых банки стерилизовали!

Стерилизация банок в электрической духовке

Чтобы процесс стерилизации не вызвал проблем, необходимо сначала хорошенько осмотреть банки, проверить их состояние, нет ли сколов, трещин – подходят ли они для консервирования. Все плохие емкости отбраковывают до стерилизации, чтобы они не занимали места в духовке.

Интересно!

 Вместе с банками можно стерилизовать в духовке и крышки (это относится только к железным крышкам без резинок). Их просто хорошенько вымывают, а затем выкладывают рядом с емкостями на противень или решетку. Крышки с резинками кипятят от 5 до 15 минут.

Фото стерилизации банок в электрической духовке

Считается, что в электрической духовке температура распределяется более равномерно, поэтому именно в ней проще всего проводить стерилизацию. Проходит этот процесс в несколько этапов.

  1. Банки вымывают и просушивают. Духовку тоже желательно вымыть, чтобы она не имела отрицательных запахов.
  2. Емкости размещаются на противне или решетке в свободном порядке. Они не должны соприкасаться! Если они сухие, то ставят их дном к верху, а если мокрые, то горлышком кверху.
  3. Готовый противень или решетка ставятся в холодную духовку и только после этого можно ее начать нагревать. Температура в 150 градусов считается оптимальной для данной процедуры.
  4. После того, как время стерилизации завершилось, необходимо выключить духовку (если она сама не выключилась по таймеру) и через 5-10 минут извлечь банки – они должны немного остыть перед этим.

Стерилизация банок в газовой духовке

Советуем к прочтению другие наши статьи

Фото стерилизации банок в газовой духовке

Если электрической духовки нет, можно с успехом провести стерилизацию и в газовой духовке. Это не трудно и не менее эффективно. Изначальные процедуры ничем не отличаются – нужно вымыть банки, крышки, поставить их на противень или решетку и установить в холодную духовку.

  • Нагревают духовку на слабом огне, чтобы банки не лопнули.
  • Для стерилизации банок в газовой духовке нужна температура в 180 градусов.
  • После того, как стерилизация завершится, печь выключают, но банки оставляют там еще на 5-10 минут, чтобы температура немного упала. И только затем можно аккуратно извлечь емкости и определить их на чистое полотенце.

Время стерилизации банок в духовке

Время стерилизации банки зависит от ее литража

В зависимости от того какого размера емкости ставят в духовку, может отличаться и время их стерилизации.

Объем банки (литры) Время (минуты)
0,5-0,75 10
1 15
2 20
3 25-30

 

 

 

 

Важно!

В газовой и электрической духовке банки стерилизуют одинаковое время. Отличия касаются только объема банок.

Чтобы не пропустить время, когда банки нужно вынимать, лучше заводить будильник или таймер. Некоторые духовки оснащены таймером – они выключаются, когда заканчивается выставленное время. Если такой функции на духовке нет, нужно заводить будильник или таймер на телефоне, дабы не передержать посуду.

Стерилизация банок с заготовками

Фото стерилизации банок в духовке с заготовками

В некоторых рецептах указывается, что стерилизацию нужно проводить уже вместе с заготовками. Это делается для того, чтобы консервация намного дольше сохранилась. Стерилизацию банок с заготовками в духовке тоже можно проводить.

  • Для начала банки хорошо моют, сушат и заполняют заготовками.
  • После того, как вся партия консервации готова, необходимо прикрыть заготовки крышками (но не закрывать полностью) и разместить на противне.
  • Ставится противень с банками в холодную духовку!
  • Температура в духовке постепенно повышается до 100 градусов и только затем начинается отсчет таймера.
  • Время обработки обычно указывается в рецепте.

Важно!

Если банки с заготовками перед стерилизацией закатать крышками они взорвут прямо в духовке из-за значительного повышения температуры!

  • После того, как время закончится, необходимо выключить духовку и подождать около 5 минут, чтобы духовка немного остыла.
  • Теперь можно извлекать наполненные заготовками банки и закатывать их.

Все работы по стерилизации проводятся с использованием прихваток, потому как банки, духовка и сами заготовки после стерилизации, очень горячие.

Стерилизация банок в духовке – простой и эффективный метод продлить срок хранения домашней консервации. Метод прост и экономит время, что немаловажно в случае, когда времени мало, а продуктов для обработки очень много. Главное придерживаться правил и выполнять работу без спешки.

Стерилизация банок и заготовок — 25 Декабря 2014

Правильная стерилизация – это основа долгого и успешного хранения закаток, поэтому важно знать и соблюдать основные правила стерилизации. Многие делают закатки на зиму, и по большому счету нет ничего сложного как в стерилизации самих банок и крышек, так и в стерилизации банок с заготовками. Но у тех, кто впервые решился сделать заготовку на зиму, может возникнуть много вопросов. Как стерилизовать банки? Сколько накладывать овощей в банку? Сколько наливать маринада? Сколько воды должно быть в кастрюле? Чем взять горячую банку? И как правильно стерилизовать банки с заготовками? Что считается временем стерилизации? На эти и многие другие вопросы новичков и я постараюсь ответить в этой статье.

Любая консервация начинается с подготовки овощей и фруктов. Овощи тщательно моем в холодной проточной воде. Если это огурцы или другие овощи, которые имели контакт с землей, то не лишним будет мытье с мягкой щеткой.

Помытые овощи или фрукты складываем в чистую эмалированную миску, вода должна стечь, а сами овощи просохнуть. Не менее тщательно моем зелень, аналогичное требование к просушке.

Как стерилизовать банки и крышки

Перед стерилизацией банки обязательно моем, даже если они нам кажутся кристально чистыми. Банки и крышки моются пищевой содой под проточной водой. Если посуда сильно загрязнена, то сначала моем с кухонным мылом, ополаскиваем, а уже затем моем содой.

Самым простым и безотказным методом стерилизации банок и крышек, которым пользовались еще наши бабушки, — это кипячение.

Итак, ставим на огонь чистую кастрюлю с водой. Прежде чем банку опустить в кипяток, ее сначала прогреваем, чтобы та не лопнула. Для этого набираем в чашку немного кипящей воды и аккуратно обдаем водой банку.

Когда банка прогреется, помещаем ее в кипящую воду. Совсем не обязательно, чтобы банка помещалась в стоячем положении, ее удобно положить на бок, именно поэтому для стерилизации банок обычно используют широкую кастрюлю. Баночку поворачиваем, чтобы та хорошенько простерилизовалась внутри и снаружи со всех сторон.

Каждую банку стерилизуем 2–3 минуты. В этой же воде стерилизуем крышки 2–3 минуты.

Горячие банки аккуратно достаем из воды, внутри воду не оставляем. Обычно банки мгновенно высыхают. Стерильные банки ставим на чистый стол. Банки накрываем стерильными крышками.

Как стерилизовать банки с заготовками

Помытые и просушенные овощи чистыми руками плотно укладываем в банки до линии плечиков. Заготовки нельзя укладывать до самого верха, всегда следует оставлять зазор хотя бы полтора-два сантиметра. Это связано с тем, что при нагревании все тела увеличиваются в объеме (обычная физика). Если уложить до самого верха, то во время стерилизации содержимое банки начнет выливаться.

Банки накрываем крышками, чтобы избежать попадания внутрь пыли, мошек, ворсинок, человеческой слюны и т. д.

Готовим маринад, как указано в выбранном рецепте. Обычно на литровую банку идет 1,5 стакана маринада, но может пойти и меньше, в зависимости от того, насколько плотно уложены овощи. Следует помнить, что морская, йодированная, а также соль «Экстра» для закаток не годится. Берем обычную каменную соль. Маринад должен хорошо прокипеть.

Если указано в рецепте, то сначала наливаем в банку уксус, а затем маринад.

Кипящий маринад наливаем в банку с овощами, обязательно оставляем зазорполтора-два сантиметра, при этом маринад должен покрывать овощи. Накрываем банку крышкой.

Обычно маринад заливается не сразу во все банки, а поочередно. Это значит: наливаем маринад в первую банку с заготовкой, накрываем крышкой, ставим стерилизоваться в кипящую воду. Затем наливаем маринад во вторую банку, накрываем крышкой и ставим в кастрюлю, затем третью, и так столько раз, сколько влезет банок.

После стерилизации и закатки первой партии банок с заготовками, повторяем весь процесс для второй партии: готовим (кипятим) маринад, поочередно заливаем и ставим стерилизоваться.

Что нужно для стерилизации банок с заготовками

Для стерилизации кипячением обычно используется довольно большая и широкая кастрюля, в которую можно поставить несколько банок/бутылей. Наливаем в нее необходимое количество воды, которое замеряем заранее, здесь как раз пригодится знание закона Архимеда. Ставим кастрюлю на огонь.

Когда вода закипит, кладем на дно чистое полотенце, чтобы избежать прямого контакта стекла с раскаленным дном кастрюли.

Банки с заготовкой ставим на полотенце. Обращаем внимание на уровень воды в кастрюле. Вода не должна доходить до горлышка банок примерно на 2 сантиметра.

Банки ставим и вынимаем из кипятка при помощи специальных щипцов, которые так и называются «щипцы на банку для консервации». Их желательно приобрести, тем более что они стоят недорого. Этими щипцами удобно захватывать горячие банки, что сильно упрощает задачу стерилизации.

Что считается временем стерилизации

После того, как поставили банки с заготовками в кастрюлю с водой, увеличиваем огонь. Когда вода в кастрюле снова закипит, засекаем время. Это и будет началом отсчета времени стерилизации. Вода в кастрюле должна кипеть, но при этом ни в коем случае не попадать внутрь банок, поэтому своевременно регулируем огонь.

В каком порядке вынимать и закатывать банки после стерилизации

Банки вынимаем из кипятка в том же порядке, в котором ставили в кастрюлю. Первой вынимаем ту, которую ставили стерилизоваться первой, и сразу же закатываем. Вынимаем вторую банку, закатываем, ставим крышкой вниз, достаем третью и т. д.

Если доставать из кипятка все банки сразу и только потом закатывать, то может нарушиться стерильность заготовки, ведь как бы вы быстро не закатывали, последние банки все же успеют остыть и нахвататься нестерильного воздуха извне.

Укутывание банок

В зависимости от рецепта банки иногда укутывают. Следует помнить, что при укутывании продлевается стерилизация заготовок. С одной стороны, хорошо, более надежно, но с другой — плохо, ведь излишняя тепловая обработка портит вкус домашних заготовок, так огурцы могут просто-напросто перевариться. Поэтому при стерилизации заготовок важно найти золотую середину, и каждый раз отмечать в своей поваренной книге, что и как делали. Тогда на следующий год вы сможете сделать заготовку на зиму с учетом ваших поправок.

Какая техника поможет сделать заготовки на зиму

Летняя борьба за урожай приносит ощутимый результат — десятки ящиков со вкусными фруктами и овощами
радуют садоводов. С трудом отвоёванные у вредителей и непогоды дары нужно или съесть, или сохранить на
зиму. Расскажем, как техника станет помощником в переработке и хранении выращенных продуктов.

Необработанными в прохладном месте хранят корнеплоды: картофель, морковь, свёклу, репу, редьку. Остальной
урожай требует переработки или минусовых температур.


Виды хранения:

  • заморозка: ягоды, грибы, зелень, горошек;
  • консервирование целиком: огурцы, помидоры, ягоды;
  • консервирование в измельчённом виде: икра, лечо, варенье, джем, пассата;
  • сушка: морковь, фрукты, зелень.

Без техники в консервировании и сушке не обойтись.

Мы свели технику и разные виды заготовок в таблицу
















 


Техника


Операция



Замораживание


Икра Варенье


Консервирование


Сушка

Блендер погружной с насадками

Измельчение

Пюрирование, измельчение

 

Измельчение

Блендер стационарный

Измельчение

Пюрирование, измельчение

 

Измельчение

Кухонный комбайн

Пюрирование, тёрка, измельчение, мясорубка

Пюрирование, тёрка, измельчение, мясорубка

 

Измельчение

Мясорубка

Мясорубка

Мясорубка

 

Мясорубка

СВЧ-печь

 

Приготовление, стерилизация банок

Приготовление, стерилизация банок

 

Настольная плитка: электрическая или газовая

Приготовление

Приготовление, стерилизация банок

Приготовление, стерилизация банок

 

Мультиварка

Приготовление

Приготовление

Приготовление

 

Аэрогриль

Приготовление

Приготовление, стерилизация банок

Приготовление, стерилизация банок

 

Сушилка для овощей и фруктов

 

 

 

Сушка

Вакууматор

Упаковка

 

 

Упаковка

Морозильная камера

Заморозка и хранение

 

 

 

Холодильник

 

Хранение

Хранение

Хранение

Расскажем о каждом виде отдельно.

Погружной блендер

Блендер состоит из ручки с мотором внутри и насадок. Основная насадка — нога.

Нога

Это измельчитель с размахом ножей до 5-7 см, предназначенный для погружения в посуду и измельчения её
содержимого.

Измельчитель

Ёмкость с ножами внутри. Такой же измельчитель есть в кухонном комбайне и у стационарного блендера, можно
сказать, что это их основной девайс.


Блендер Polaris PHB 0742

Венчик

Делает миксер из ручного блендера

Брать блендер только с ногой для домашних заготовок невыгодно. Единственное, что им можно сделать —
грубо пюрировать джем или повидло, порубить пассату — измельчить пастеризованные томаты без
шкурки.

В комплекте с измельчителем блендер становится полезнее — с помощью него можно нарубить зелень
для сушки или заморозки, небольшое количество ингредиентов для «вятского хренодёра» или
хреновины — заправки из помидоров с добавлением соли, уксуса, чеснока и хрена.

При прочих равных условиях: чем выше мощность блендера, тем лучше.


Дополнительные параметры:

  • гарантия — чем дольше, тем лучше;
  • бренд — при равной цене и мощности берём известную марку;
  • сопровождение — если есть включённая в цену сервисная программа, берём с ней.

Стационарный блендер

Прибор представляет собой вертикальный, открытый сверху стакан. На дне его смонтирован нож-измельчитель,
напоминающий самолётный пропеллер. Двигатель для пропеллера находится в подставке блендера.

Выполняет такой блендер только одну операцию — измельчение. Но объём больше, чем у измельчителя
погружного блендера, а конструктив в целом надёжнее.

Для консервирования — пробивки джемов, икры — стационарный блендер подойдёт лучше, чем погружной.
Но при дальнейшем использовании прибор менее универсален.

При выборе смотрим на мощность, бренд, гарантию и сервис.


Блендер Vigor HX-5930

Кухонный комбайн

Комбайн — самый универсальный измельчитель для заготовок.

Классический кухонный комбайн — это большая чаша, внизу которой вращается нож. На входе в чашу
комбайна можно установить диск с тёркой или слайсером. А вместо ножей — другие рабочие насадки.

Ножи в чаше комбайна имеют больший размах, а сама чаша — больший объём, чем у стационарного блендера.

На комбайне можно и лук порезать, и морковь натереть, и мелко порубить кабачки для икры. При известной
сноровке — тонко порезать яблоки для сушки. Справится комбайн и со всеми функциями блендера.

Многие комбайны умеют месить тесто. По крайней мере, не очень крутое. Ряд комбайнов при необходимости
превращается в электромясорубку.


Кухонный комбайн Philips HR7629/90


Критерии выбора:

  • универсальность, то есть количество насадок и режимов — чем их больше, тем лучше;
  • бренд;
  • гарантийный срок;
  • дополнительный сервис.

О чём стоит предупредить: часто универсальность становится главным критерием выбора в ущерб надёжности
или мощности.

Отдельный тестомес справляется со своей задачей лучше, чем комбайн. Электромясорубка более надёжна, чем
аналогичная насадка у комбайна. Поэтому, если вы каждый день месите по 5 кг теста и перерабатываете
на фарш 7 кг мяса, лучше взять отдельные приборы. А с меньшим объёмом комбайн справится легко.

Мясорубка

Если вам надо измельчить старый корень хрена, свёклу для икры, корни петрушки или сельдерея — без
мясорубки не обойтись. Даже мощный комбайн с ножами не справится с древесной структурой корневищ.
Мясорубка своим шнеком мнёт корень и подаёт под нож уже более податливое сырьё. При прочих равных,
на низких оборотах, нет кухонной техники мощнее мясорубки.

Да, мясорубка не так универсальна, как комбайн. Но если основной объём заготовок не связан с шинковкой
и тёркой, пюрированием — берём мясорубку. С той же хреновой заправкой она справится на счёт
раз.

Критерии выбора ровно такие же, как у комбайна. Не забываем про насадки — соковыжималки, трубочки
для домашней колбасы и прочие полезные приспособления.


Мясорубка Аксион М 35.01

Сушилка

Пригодится для изготовления сухофруктов, овощных чипсов, сушёной зелени и ещё многих продуктов.

Сушилку придумали, чтобы урожай успел высохнуть, не успев заплесневеть. Получился многоэтажный дуршлаг
или сито с вентилятором и нагревательным элементом. Раскладываем продукт в один слой на сито, включаем
и забываем на время — от трёх до десяти часов.

Ссыпаем в пакет и наслаждаемся результатом.

Критерии выбора сушилки: объём и площадь. Чем они больше, тем больше можно высушить продуктов за один
приём. Инфракрасный нагреватель с конвекцией стоит предпочесть обычному ТЭНу без вентилятора.


Сушилка для овощей и фруктов Мастерица ЭСБ-15/25-450

Мощность для сушилки не важна. Природу не обманешь — нагревая сильнее, мы зажарим или испечём продукт,
а не высушим.

Обращаем внимание на гарантию, дополнительный сервис, а также на удобство мытья уровней.

Микроволновая печь

На первый взгляд, как могут быть связаны микроволновка и домашние заготовки? А в микроволновке, к примеру,
очень удобно стерилизовать банки. Гораздо быстрее, чем в кастрюле с водой. Только печь должна быть
приличного объёма, чтобы банки не пришлось класть на бок.

Конечно, трёхлитровая банка ни в одну СВЧ-печь не влезет, тут уж по старинке — кастрюля или духовка.

А ещё в микроволновке быстро готовятся овощи для икры или лечо. Читаем инструкцию и готовим по ней.

Критерии выбора: объём и мощность. Остальные фишки в виде гриля, кучи программ и прочего для домашнего
консервирования не так важны. Но микроволновку можно использовать не только для консервирования.


Микроволновая печь BBK 23MWC-881T/B-M цвет чёрный

Мультиварка

Если конфорки на плите закончились, а нужно сварить варенье из вишни, доверьте это мультиварке. Положили,
закрыли, забыли — примерно так выглядит процесс.

Лечо, икра — всё, что требуется варить — это к мультиварке.

Кроме заготовок, техника пригодится и в повседневном быту. Практически 85 % обычной еды можно приготовить
в мультиварке, экономя массу времени — ничего не надо помешивать и переворачивать.


Мультиварка-скороварка Polaris PPC 1203AD

Критерии выбора: мощность, объём, материал чаши и её покрытие. Важный момент — некоторые мультиварки
имеют режим скороварки и соответствующие крышки с замком. Наличие такого режима может стать весомым
аргументом при выборе.

Настольная плитка

Иногда проще сделать заготовки на месте сбора урожая и привезти в город уже закатанные банки. Для этого
вам пригодится портативная газовая или электрическая плита.

Основной выбор — газ или электричество. Газ — быстро, электричество — просто.

Количество конфорок — 2 штуки: на одной — стерилизовать банки, на второй — готовить
варенье.

У газовых плиток оцениваем возможность подключения разных баллонов — как пятилитровых, так и маленьких,
туристических.

У электрических оцениваем мощность, и чтобы не ждать три часа закипания воды, берём самую большую.


Настольная электроплитка ZENCHA ЭПТ2-2.0/220 Pskova-2

Аэрогриль

Идеальный прибор для стерилизации банок — быстро, качественно, эффективно. Кроме того, на нём можно
приготовить множество блюд.

Но если на кухне мало места, а стейки вы едите не каждый день, покупка аэрогриля может выглядеть авантюрой.

При выборе оцениваем мощность, тип нагревательного элемента, универсальность, лёгкость очистки.


Аэрогриль Smile AG 202

Вакууматор

Полезный прибор, который сэкономит место в холодильнике или в шкафу. Продукты, предназначенные для заморозки,
помещаем в пакет, откачиваем воздух и отправляем в морозилку.


Вакуумный упаковщик Redmond RVS-M020

Сушёные продукты — в пакет, в вакууматор и в шкаф. Вакуумированный продукт не выдыхается, не заветривается
и места занимает на 50-95 % меньше, чем просто насыпанный в пакет.

 

Стерилизация банок

И снова здравствуйте, дорогие читатели сайта «Семье на заметку»! В одной из прошлых статей я начала тему консервирование, познакомив вас с рецептом вкусных консервированных огурцов. В комментариях речь зашла о разных способах стерилизации банок, и я пообещала познакомить вас с ними. Выполняю обещание. Тема сегодняшней статьи – стерилизация банок разными способами.

Стерилизация банок

Летом начинается пора заготовок впрок овощей, ягод, фруктов, грибов…  Домашние заготовки обходятся гораздо дешевле купленных в магазине. Но самое главное то, что вы можете приготовить их на свой вкус. Однако нередки бывают случаи, когда банки «взрываются».  Чтобы продукты и затраченные вами усилия не оказались потраченными зря, нужно правильно произвести стерилизацию банок. Суть стерилизации заключается в нагревании до определенной температуры, при которой погибают различные микроорганизмы, вызывающие порчу консервов.

Ниже я познакомлю вас с различными способами стерилизации банок. У каждой хозяйки есть свои предпочтительные способы. Вы можете ознакомиться с разными способами стерилизации и выбрать наиболее оптимальный для вашего случая.

Стерилизация банок кипятком или на пару

Стерилизация пустых банок:

  • Банки тщательно вымыть с пищевой содой и хорошенько сполоснуть. После этого обдать кипятком и поставить вниз горлышком на кипящий чайник. Стерилизовать 10-15 минут.
  • Аналогичную процедуру можно сделать с помощью кастрюли: вскипятите в кастрюле воду, сверху поставьте на нее сито или положите решетку, на которую поставьте банки горлышками вниз. Обрабатывайте на пару 10-15 минут.
  • 3-й способ: банку вымыть, обдать 2 раза кипятком, затем залить ее горячей водой и дать постоять 3 минуты. За это время можно подготовить крышки. Для этого их нужно положить в кипящую воду и прокипятить в течение 2-х минут. Затем сливаем воду из банок, сразу же по рецепту закладываем продукты, закрываем крышкой и закатываем.

Стерилизация заготовок:

  • На дно кастрюли положите сложенную в несколько слоев тряпочку или полотенце. Подготовленные банки с заготовками поставьте в кастрюлю и накройте сверху крышками. Теперь налейте в кастрюлю холодную воду, чтобы она доходила до плечиков банок. Поставьте кастрюлю на огонь, доведите до кипения и стерилизуйте банки на слабом огне в течение 10-15 минут. После этого выньте банки и закатайте их крышками. Переверните банки кверху дном и оставьте до остывания.
  • Как вариант банки можно не заливать холодной водой, а ставить в кастрюлю с горячей водой температуры 50-60°С. Далее все так же, как в предыдущем случае.
  • В случае, если заготовки заливаются кипящим маринадом, рассолом и т.п., то банки можно сразу герметически закупорить, поместить их в кастрюлю с горячей водой и стерилизовать минут 10. Затем осторожно вынуть и перевернуть вверх дном до остывания.

Помните: если после переворачивания банок вверх дном из них выделяется жидкость, это означает, что герметичность нарушена, и такую банку следует перестерилизовать  и вновь герметично закрыть.

Стерилизация банок в духовке

Электрические или газовые духовки сегодня есть практически в каждом доме. Поэтому этот способ стерилизации банок тоже может многим подойти.

Стерилизация пустых банок: 

  • Банки, разумеется, нужно вымыть, а затем поставить на решетку горлышком вниз в холодную(!) духовку. Нагреть духовку примерно до 150°С, и после этого стерилизовать около 15 минут. По окончании стерилизации на банках не должно остаться капель. Затем осторожно выньте горячие банки из духовки, и далее закладывайте в них продукты по рецепту.
  • Если банки высокие и не убираются в духовку стоя, их можно стерилизовать на боку.

Стерилизация заготовок:

  • Поставить в холодную духовку банки с заготовками, не накрывая их крышками. Нагреть духовку до 100°С. Литровые банки стерилизовать 15 минут. Если банки большей емкости, то время стерилизации увеличивается. Затем банки осторожно достать из духовки, тут же их закатать подготовленными крышками, перевернуть и оставить до остывания.

 

Как стерилизовать банки в микроволновке

Микроволновка сегодня тоже присутствует практически на каждой кухне, и это современное чудо техники тоже можно с успехом использовать для стерилизации банок. Однако этот метод подходит лишь для небольших банок.

Стерилизация пустых банок:

  • Вымыть банки и мокрыми поставить их в микроволновку. Включить ее на полную мощность. Как только банки высохнут – они готовы к закрутке. Не упустите момент, иначе банки треснут. Вам может понадобиться всего 1-2 минуты. Это самый быстрый способ стерилизации.
  • Другой способ: налейте в банки воды на уровень 1 см и поставьте их в микроволновку на полную мощность минуты на 3. Если банок много, или мощность микроволновки небольшая, то время нужно увеличить. Вода в банках должна закипеть, и они обработаются паром. Если банка не убирается по высоте, ее можно положить на бок. Поскольку воды немного, она не вытечет через горлышко.

Стерилизация заготовок:

  • Поставьте в микроволновку банки с заготовками, не закрывая их крышками. Включите микроволновку на полную мощность. Как только содержимое банок закипит, переключите на минимальную мощность и стерилизуйте 2-3 минуты. Затем выньте банки и закатайте их подготовленными крышками.

Ну вот, теперь, я думаю, стерилизация банок не вызовет у вас сложностей. Осталось только определиться со способом стерилизации. Как видите, существует много разных способов, и выбор самого подходящего остается за вами.

Надеюсь, этот материал был полезен для вас! Не забудьте поделиться им с друзьями через кнопочки соц.сетей.

Я жду вас вновь на страницах своего блога «Семье на заметку»! А кто заглянул сюда впервые, советую ознакомиться с картой сайта. Там вы найдете много интересного материала!

 

методов стерилизации | Руководство по дезинфекции и стерилизации | Библиотека руководств | Инфекционный контроль

После того, как предметы очищены, высушены и осмотрены, предметы, требующие стерилизации, должны быть завернуты или помещены в жесткие контейнеры и размещены в лотках/корзинах для инструментов в соответствии с инструкциями, предоставленными AAMI и другими профессиональными организациями 454, 811 -814, 819, 836, 962 . В этих рекомендациях указано, что шарнирные инструменты следует открывать; изделия со съемными частями должны быть разобраны, если только изготовитель устройства или исследователи не предоставили специальные инструкции или данные испытаний об обратном 181 ; сложные инструменты должны быть подготовлены и стерилизованы в соответствии с инструкциями производителя и данными испытаний; устройства с вогнутыми поверхностями следует располагать так, чтобы облегчить отвод воды; тяжелые предметы следует располагать так, чтобы не повредить хрупкие предметы; а вес набора инструментов должен основываться на конструкции и плотности инструментов и распределении массы металла 811, 962 . Хотя для хирургических наборов больше не существует ограничения по весу при стерилизации, масса тяжелых металлов является причиной намокания упаковок (т. е. влаги внутри футляра и лотка после завершения цикла стерилизации) 963 . Другими параметрами, которые могут влиять на сушку, являются плотность витков и конструкция комплекта 964 .

Существует несколько вариантов методов поддержания стерильности хирургических инструментов, включая жесткие контейнеры, открывающиеся пакеты (например, самозапечатывающиеся или термосвариваемые пластиковые и бумажные пакеты), рулоны или катушки (т.например, бумажно-пластиковые комбинации трубок, предназначенные для того, чтобы пользователь мог обрезать и запечатать концы для формирования пакета) 454 и стерилизационные обертки (тканые и нетканые). Медицинские учреждения могут использовать все эти варианты упаковки. Упаковочный материал должен допускать проникновение стерилизующего средства, обеспечивать защиту от контактного заражения во время манипуляций, обеспечивать эффективный барьер для проникновения микробов и сохранять стерильность обрабатываемого предмета после стерилизации  965 . Идеальная обертка для стерилизации должна успешно обеспечивать барьерную эффективность, проницаемость (т.е. позволяет проникать стерилизующему средству), аэрацию (например, позволяет рассеивать ETO), простоту использования, драпируемость, гибкость, устойчивость к проколам, прочность на разрыв, токсичность, запах, утилизацию отходов. , линтинг, стоимость и прозрачность 966 . Неприемлемая упаковка для использования с ETO (например, фольга, поливинилхлорид и поливинилиденхлор [прозрачная пленка кухонного типа]) 814 или газообразная плазма перекиси водорода (например,ж., постельное белье и бумага) не следует использовать для упаковки медицинских изделий.

При централизованной обработке двойной перенос может выполняться последовательно или непоследовательно (т. е. одновременный перенос). Обертывание должно быть сделано таким образом, чтобы избежать тентов и зазоров. В последовательной обертке используются два листа стандартной стерилизующей обертки, завернутые один за другим. Эта процедура создает пакет внутри пакета. В непоследовательном процессе используются два листа, обернутые одновременно, поэтому обертывание необходимо выполнить только один раз.Этот последний метод обеспечивает многоуровневую защиту хирургических инструментов от загрязнения и экономит время, поскольку обертывание выполняется только один раз. Несколько слоев по-прежнему являются обычной практикой из-за суровых условий обращения на предприятии, даже несмотря на то, что барьерная эффективность одного листа обертки за последние годы улучшилась 966 . Письменные и иллюстрированные процедуры подготовки предметов к упаковке должны быть легко доступны и использоваться персоналом при выполнении процедур упаковки 454 .

Паровая стерилизация | Руководство по дезинфекции и стерилизации | Библиотека руководств | Инфекционный контроль

Основной принцип паровой стерилизации, выполняемой в автоклаве, состоит в том, чтобы подвергнуть каждый предмет прямому контакту с паром при требуемой температуре и давлении в течение определенного времени. Таким образом, существует четыре параметра паровой стерилизации: пар, давление, температура и время. Идеальным паром для стерилизации является сухой насыщенный пар и увлеченная вода (доля сухости ≥97%). 813, 819  Давление служит средством получения высоких температур, необходимых для быстрого уничтожения микроорганизмов. Для обеспечения микробицидной активности необходимо получить определенные температуры. Двумя распространенными температурами стерилизации паром являются 121°C (250°F) и 132°C (270°F). Эти температуры (и другие высокие температуры) 830 должны поддерживаться в течение минимального времени для уничтожения микроорганизмов. Признанные минимальные периоды воздействия для стерилизации упакованных предметов медицинского назначения составляют 30 минут при 121°C (250°F) в гравитационном стерилизаторе или 4 минуты при 132°C (270°F) в предварительно вакуумном стерилизаторе (таблица 7).При постоянной температуре время стерилизации варьируется в зависимости от типа предмета (например, металл или резина, пластик, предметы с просветами), того, завернут предмет или нет, и типа стерилизатора.

Двумя основными типами паровых стерилизаторов (автоклавов) являются гравитационный автоклав и высокоскоростной предвакуумный стерилизатор. В первом случае пар поступает сверху или по бокам стерилизационной камеры и, поскольку пар легче воздуха, вытесняет воздух из нижней части камеры через дренажное отверстие.Автоклавы гравитационного вытеснения в основном используются для обработки лабораторных сред, воды, фармацевтических продуктов, регулируемых медицинских отходов и непористых изделий, поверхности которых находятся в прямом контакте с паром. Для самотечных стерилизаторов время проникновения в пористые предметы увеличивается из-за неполного удаления воздуха. Этот момент иллюстрируется обеззараживанием 10 фунтов микробиологических отходов, для чего требуется не менее 45 минут при температуре 121 °C, поскольку захваченный воздух, остающийся в загрузке отходов, значительно замедляет проникновение пара и эффективность нагрева. 831, 832  Высокоскоростные предвакуумные стерилизаторы аналогичны гравитационным стерилизаторам, за исключением того, что они оснащены вакуумным насосом (или эжектором), обеспечивающим удаление воздуха из стерилизационной камеры и загрузку до поступления пара. Преимущество использования вакуумного насоса заключается в почти мгновенном проникновении пара даже в пористые материалы. Тест Боуи-Дика используется для обнаружения утечек воздуха и неадекватного удаления воздуха и состоит из сложенных хирургических полотенец из 100% хлопка, которые являются чистыми и предварительно кондиционированными.Имеющийся в продаже тестовый лист типа Боуи-Дика должен быть помещен в центр упаковки. Тестовый пакет следует поместить горизонтально в переднюю, нижнюю часть штатива стерилизатора, рядом с дверью и над сливом, в пустой камере и выдержать при температуре 134°C в течение 3,5 минут. 813, 819  Тест проводится каждый день использования парового стерилизатора вакуумного типа перед первой обрабатываемой загрузкой. Воздух, который не удален из камеры, будет мешать контакту пара. Одноразовые тестовые упаковки меньшего размера (или устройства для контрольных испытаний) были разработаны для замены стопки сложенных хирургических полотенец для проверки эффективности вакуумной системы в предвакуумном стерилизаторе. 833  Эти устройства «предназначены для имитации продукта, подлежащего стерилизации, и представляют собой определенную задачу для процесса стерилизации». 819, 834  Они должны быть репрезентативными для нагрузки и имитировать самые большие проблемы с нагрузкой. 835  Вакуумные характеристики стерилизатора приемлемы, если лист внутри тестовой упаковки демонстрирует равномерное изменение цвета. Захваченный воздух вызовет появление пятна на тестовом листе из-за неспособности пара достичь химического индикатора.Если стерилизатор не прошел тест Боуи-Дика, не используйте его до тех пор, пока он не будет проверен обслуживающим персоналом стерилизатора и не пройдет тест Боуи-Дика. 813, 819, 836

Другим вариантом паровой стерилизации является процесс импульсной промывки паром под давлением, при котором воздух быстро удаляется за счет многократного чередования промывки паром и импульса давления выше атмосферного. Воздух быстро удаляется из загрузки, как и в предвакуумном стерилизаторе, но утечки воздуха не влияют на этот процесс, поскольку давление пара в стерилизационной камере всегда выше атмосферного. Типичные температуры и время стерилизации составляют от 132°C до 135°C с выдержкой от 3 до 4 минут для пористых материалов и инструментов. 827, 837

Как и другие системы стерилизации, паровой цикл контролируется механическими, химическими и биологическими мониторами. Паровые стерилизаторы обычно контролируются с помощью распечатки (или графически) путем измерения температуры, времени при температуре и давлении. Как правило, химические индикаторы прикрепляются снаружи и встраиваются в упаковку для контроля температуры или времени и температуры.Эффективность паровой стерилизации контролируют с помощью биологического индикатора, содержащего споры Geobacillus stearothermophilus (ранее Bacillus stearothermophilus ) .  Положительные результаты теста на наличие спор являются относительно редким событием  838  и могут быть связаны с ошибкой оператора, недостаточной подачей пара, 839  или неисправностью оборудования.

Портативные (настольные) паровые стерилизаторы применяются в поликлиниках, стоматологических и сельских поликлиниках. 840  Эти стерилизаторы предназначены для небольших инструментов, таких как шприцы и иглы для подкожных инъекций, а также стоматологические инструменты. Способность стерилизатора достигать физических параметров, необходимых для достижения стерилизации, следует контролировать с помощью механических, химических и биологических индикаторов.

Использование в автоклаве

Химические индикаторы

Ленточные индикаторы

Ленточные индикаторы

представляют собой бумажную ленту с клейкой основой и термочувствительными химическими индикаторными метками.Ленточные индикаторы меняют цвет или отображают диагональные полосы, слова «стерильно» или «автоклавировано» при воздействии температуры 121°C. Ленточные индикаторы обычно размещаются на внешней стороне загрузки отходов. Если на термочувствительной ленте не указано, что в процессе стерилизации была достигнута температура не ниже 121°C, загрузка не считается обеззараженной. Если индикаторы ленты выходят из строя при двух последовательных загрузках, сообщите об этом менеджеру по безопасности отдела.

Ленточные индикаторы

не предназначены и не предназначены для доказательства фактического уничтожения организмов.Они показывают, что в автоклаве была достигнута температура 121°C. EHS рекомендует НЕ использовать автоклавную ленту в качестве единственного индикатора обеззараживания или стерилизации.

Встроенные химические индикаторные полоски

Встроенные химические индикаторные полоски обеспечивают ограниченную проверку температуры и времени, отображая изменение цвета после воздействия нормальной рабочей температуры автоклава 121ºC в течение нескольких минут. Химические индикаторы изменения цвета могут быть помещены в загрузку отходов.Если химические индикаторы выходят из строя при двух последовательных загрузках, сообщите об этом менеджеру по технике безопасности вашего отдела.

Биологические индикаторы

Флаконы с биологическим индикатором содержат споры B. stearothermophilus , микроорганизма, который инактивируется при воздействии насыщенного пара 121. 1 o C в течение как минимум 20 минут. Автоклавы, используемые для обработки биологических отходов, будут оцениваться EHS ежеквартально с помощью биологического индикатора.

Процедура

  • EHS будет координировать биологические валидационные испытания с персоналом лаборатории.
  • Индикаторы инкубируют с помощью EHS в течение 24 часов при 60°C с контролем, который поддерживается при комнатной температуре.

Результаты

  • Если автоклавированный индикатор демонстрирует рост, проверка не пройдена и будет повторена.
  • Если второй индикатор проверки не сработает, EHS уведомит об этом руководителя отдела безопасности и запросит обслуживание автоклава. Автоклав не следует использовать до тех пор, пока не будет проведено обслуживание и пройдены валидационные испытания.
  • Результаты проверочных испытаний отправляются сотрудниками EHS по электронной почте в соответствующие лаборатории и руководителю службы безопасности отдела.
  • EHS ведет документацию по всем проверочным испытаниям.

Ведение учета:

Протокол автоклава:

Персонал лаборатории должен вести журнал автоклава, содержащий следующие данные:

  • Дата, время и имя оператора
  • Контактная информация: Лаборатория, номер кабинета, телефон
  • Тип материала стерилизованный/цикл
  • Температура, давление и продолжительность стерилизации загрузки.

Результаты испытаний биологического индикатора

  • EHS сохраняет все результаты испытаний биологических индикаторов.

Рекомендуемые процедуры очистки и дезинфекции бассейнов для ног в салонах

На этой странице содержится информация для владельцев салонов, операторов и работников о дезинфекции оборудования для педикюра. Информация для клиентов салона спа для ног.

На этой странице:


Меры предосторожности для клиентов — защита клиента

  • Проверьте состояние ступней и ног клиента:  При наличии открытых язв или кожных ран (включая укусы насекомых, царапины, струпья или любое состояние, ослабляющее кожный барьер), объясните клиенту, почему они не следует использовать ванночки для ног.
  • Полный педикюр или восковая эпиляция после ванночки для ног:  Любая процедура, которая может повредить кожу клиента, не должна выполняться до замачивания ног в ванночке для ног.

Пошаговые инструкции по дезинфекции оборудования для педикюра для ног

После каждого клиента:  (это может происходить в любое время после того, как ноги клиента вынуты из ванночки для ног, во время массажа ног, покраски пальцев ног или других возможностей)

  1. Слейте  воду из ванны или чаши ванны для ног и удалите все видимые загрязнения.
  2. Очистите поверхности ванны для ног с мылом или моющим средством, промойте чистой водой и слейте воду.
  3. После очистки продезинфицируйте*  поверхности дезинфицирующим средством для больниц , зарегистрированным EPA (см. описание на этикетке) в соответствии с инструкциями производителя на этикетке. Поверхности должны оставаться смоченными дезинфицирующим средством в течение  10 минут или времени, указанного на этикетке,  , которое может быть короче.
    * Для гидромассажных ванн для ног, аэродинамических ванн, ванн для ног без труб и других циркуляционных ванн:  Для дезинфекции лучше всего наполнить ванну чистой водой, добавить соответствующее количество жидкого дезинфицирующего средства и перевернуть устройство на циркуляции дезинфицирующего средства в течение всего времени контакта.
  4.  После дезинфекции  слейте и промойте  чистой водой.

Ночной:

  • Для гидромассажных ванн для ног, аэродинамических ванн, ванн для ног без труб и других циркуляционных ванн:
  1. Снимите  сетку фильтра, впускные форсунки и все другие съемные детали из резервуара и очистите от мусора, оставшегося за ними или внутри них.

    Чаша кресла для спа-педикюра с сетчатым фильтром, впускными форсунками и другими съемными частями, требующими особого внимания в процессе дезинфекции.

  2. С помощью щетки почистите эти детали мылом или дезинфицирующим средством (следуя инструкциям по очистке).
  3. Промойте снятые детали чистой водой и поместите их обратно в бассейн.
  4. Наполните таз чистой водой и добавьте больничное дезинфицирующее средство , зарегистрированное EPA, следуя указаниям на этикетке. Включите устройство и прокачайте систему жидкостью в течение 10 минут или времени, указанного на этикетке, если оно отличается.(Вихревой механизм ванны должен работать в течение всего периода дезинфекции, чтобы продезинфицировать трубопровод и внутренние компоненты, содержащие скрытые бактерии.)
  5. После дезинфекции слить воду, промыть и высушить на воздухе.
  • Для простых бассейнов (без циркуляции):
  1. Слейте чашу и удалите весь видимый мусор
  2. Почистите чашу чистой щеткой и мылом или дезинфицирующим средством (следуя инструкциям по очистке). Промыть и слить .
  3. Продезинфицируйте поверхности раковины с помощью и зарегистрированного EPA больничного дезинфицирующего средства , следуя инструкциям производителя. Поверхности должны оставаться влажными дезинфицирующим средством в течение 10 минут или времени контакта, указанного на этикетке.
  4. Опорожните резервуар и удалите весь видимый мусор.

Этикетка с информацией о дезинфицирующих средствах

На этикетке должно быть четко указано, что продукт является больничным или медицинским дезинфицирующим средством.В нем также могут быть указаны следующие организмы:

  • Золотистый стафилококк
  • Salmonella enterica (ранее S. choleraesuis)
  • Синегнойная палочка

На этикетке продукта должен быть четко указан регистрационный номер EPA.

На этикетке также будут указаны места использования, связанные со здравоохранением.

Важные дополнительные меры

  • Соблюдайте правила и нормы штата:  В некоторых штатах требуется еженедельная промывка механизма гидромассажа отбеливателем, при этом отбеливатель должен оставаться в контакте более восьми часов.Салоны должны проконсультироваться с государственными правилами косметологии, чтобы убедиться, что они соответствуют.
  • Прочтите все этикетки и инструкции по эксплуатации:  Всегда следуйте указаниям на этикетках дезинфицирующих средств и сверяйтесь с инструкциями по эксплуатации бассейнов для ног. Следует соблюдать осторожность при использовании соответствующих доз продуктов, чтобы предотвратить повреждение спа для ног.
  • Знайте состояние своего оборудования:  Если гидромассажная ванна для ног не подвергалась регулярной очистке и дезинфекции, вам может потребоваться больше, чем просто шаги по обслуживанию, перечисленные выше, чтобы удалить скопление бактерий из системы. Дополнительную информацию можно получить у производителя спа для ног. Сначала можно использовать дезинфицирующее средство более высокого уровня, зарегистрированное EPA, например, с пометкой «Туберкулоциды» (см. список этих продуктов в Списке B: Туберкулоцидные продукты, зарегистрированные EPA, эффективные против Mycobacterium tuberculosis. После надлежащей дезинфекции системы, можно использовать регулярное техническое обслуживание с очисткой и использованием больничного дезинфицирующего средства, как описано в этом документе

Связанная информация

Общая информация, касающаяся проблем со здоровьем, правил, использования и обслуживания спа для ног от частных организаций, государственных и федеральных агентств.

  • Информация Центров по контролю и профилактике заболеваний
  • Дополнительная информация о спа-педикюре
  • Информация о состоянии

Стоматологи: Школа стоматологии Университета Индианы: IUPUI

Как создать учетную запись?

Примечание: Веб-портал SMS временно недоступен для обновления. Чтобы получить доступ к отчетам или если у вас есть вопросы, позвоните нам по телефону 317-274-5411 или напишите нам по адресу [email protected]

  1. Заполните форму, чтобы создать новую учетную запись.
  2. После отправки формы вы получите электронное письмо с уведомлением о том, что ваша информация проверяется.
  3. После подтверждения вашей учетной записи вы получите два электронных письма: одно с именем пользователя вашего профиля и одно с паролем вашего профиля.
  4. После получения имени пользователя и пароля войдите в свою учетную запись.
  5. После первого входа в систему вам позвонят не более чем через два рабочих дня.Во время этого телефонного звонка мы проведем вас через первоначальную настройку учетной записи и сообщим вам номер вашей учетной записи.
  6. После того, как вы получите номер счета для своего стерилизатора, вы сможете заказать тест-полоски онлайн.

Если у вас есть какие-либо вопросы или комментарии, свяжитесь с нами, и мы свяжемся с вами в течение двух рабочих дней.

Как присваиваются и используются номера счетов?

SMS содержит текущий список доступных номеров счетов, которые мы присваиваем стерилизаторам по мере того, как клиенты присоединяются к нашей службе.Номер вашего счета привязан к индивидуальному стерилизатору и проштампован на каждом конверте с двойным карманом. Ссылайтесь на него во всей переписке.

Если в вашем офисе тестируется более одного стерилизатора, каждому стерилизатору должен быть присвоен отдельный учетный номер , чтобы обеспечить надлежащее ведение записей. Если ваш офис покупает новый стерилизатор, вы должны позвонить нам, прежде чем использовать какие-либо тесты на споры, чтобы мы могли присвоить вашему новому стерилизатору другой учетный номер.

Как контролируется процесс стерилизации?

Процедуры стерилизации следует контролировать с помощью сочетания механических, химических и биологических методов, предназначенных для оценки условий стерилизации и эффективности процедуры.

Механические методы

Механические методы контроля стерилизации включают оценку времени цикла, температуры и давления стерилизационного оборудования путем наблюдения за датчиками или дисплеями на стерилизаторе. Некоторые настольные стерилизаторы имеют записывающие устройства, которые распечатывают эти параметры. Правильные показания не гарантируют стерилизацию, но неправильные показания могут быть первым признаком того, что в цикле стерилизации возникла проблема.

Химические индикаторы

Внутренние и внешние химические индикаторы используют чувствительные химические вещества для оценки физических условий, таких как температура, во время процесса стерилизации.Химические индикаторы, такие как термочувствительная лента, быстро меняют цвет при достижении заданного параметра.

Внутренний химический индикатор должен быть помещен в каждую упаковку для стерилизации, чтобы убедиться, что стерилизующий агент проник в упаковочный материал и действительно достиг инструментов внутри. Внешний индикатор следует использовать, когда внутренний индикатор не виден снаружи упаковки.

Внутренние индикаторы с одним параметром предоставляют информацию только об одном параметре стерилизации и доступны для пара, сухого тепла и ненасыщенного химического пара.Многопараметрические внутренние индикаторы измеряют 2–3 параметра и могут обеспечить более надежную индикацию выполнения условий стерилизации. Многопараметрические внутренние индикаторы доступны только для паровых стерилизаторов (т. е. автоклавов). Обратитесь к инструкциям производителя для правильного использования и размещения химических индикаторов.

Результаты проверки индикатора отображаются сразу после завершения цикла стерилизации и могут дать раннее указание на проблему и на ее место в процессе.Если внутренний или внешний индикатор указывает на неадекватную обработку, предмет, который был обработан, не следует использовать. Поскольку химические индикаторы не доказывают, что стерилизация была достигнута, требуется биологический индикатор (например, тест на споры).

Биологические индикаторы

Биологические индикаторы (БИ) являются наиболее распространенным средством мониторинга процесса стерилизации, поскольку они непосредственно определяют наличие наиболее устойчивых микроорганизмов (например, видов Geobacillus или Bacillus ), а не просто определяют наличие физические и химические условия, необходимые для стерилизации, соблюдены.Поскольку споры, используемые в BI, более устойчивы и присутствуют в большем количестве, чем обычные микробные загрязнители, обнаруживаемые на оборудовании для ухода за пациентами, инактивированный BI указывает на то, что другие потенциальные патогены в нагрузке также были уничтожены.

Когда истекает срок действия тестов спор?

На каждом конверте с двойным карманом указана дата истечения срока годности, что дает достаточно времени для обычного контроля. Мы не можем бесплатно заменить просроченные тесты. Тесты с истекшим сроком годности следует стерилизовать и утилизировать.

Как хранить тесты на споры?

Храните все конверты с двойным карманом в прохладном, сухом месте, вдали от стерилизатора и других источников тепла.

Как использовать тест на споры?

  1. Выньте две упаковки с тест-полосками со стороны TEST одного конверта с двойным карманом и поместите их в упаковку инструментов или лоток для стерилизации. Не открывайте маленькие пакеты, содержащие полоски со спорами. Не открывайте КОНТРОЛЬНУЮ сторону конверта с двойным карманом.
  2. Для сухожаровых стерилизаторов: поместите упаковку или лоток для тестирования спор на верхнюю полку в центре или в центр отдельной полки. Для всех других типов стерилизаторов поместите тестовую упаковку или лоток в центральное место среди других упаковок или лотков.
  3. Обработайте упаковку или лоток, содержащие пакеты со спорами, в обычном цикле стерилизации.
  4. После цикла поместите оба пакета полосок со спорами обратно в ТЕСТ-сторону конверта с двойным карманом и закройте клапан.
  5. Заполните верхнюю половину формы отчета SMS на обратной стороне листа инструкций, прилагаемого к вашему тесту.
  6. Поместите запечатанный конверт с двойным карманом и весь лист в один предоплаченный почтовый конверт и отправьте по почте. Мы проанализируем полоски со спорами, заполним нашу часть формы отчета и вернем ее вам. Если споры на тест-полосках разрастутся (предполагая, что стерилизация не прошла), мы позвоним вам и сообщим результаты, а затем отправим форму отчета.

Как долго я должен хранить результаты анализов?

Департамент здравоохранения штата Индиана требует, чтобы все заполненные формы SMS-отчетов хранились в течение пяти лет.

Когда я обрабатываю полоски со спорами, следует ли их обрабатывать в пустом автоклаве или в автоклаве с инструментами?

Полоски со спорами следует обрабатывать инструментами в течение обычного цикла нагрузки.

Как часто нужно проводить тестирование?

В штате Индиана требуется еженедельная проверка стерилизаторов. Всем остальным штатам следует обращаться в местный Департамент здравоохранения штата.

Правильное функционирование циклов стерилизации следует проверять для каждого стерилизатора путем периодического (не реже одного раза в неделю) использования биологических индикаторов (БИ).Следуйте инструкциям производителя относительно надлежащего размещения BI в стерилизаторе. Контрольный БИ (не обработанный стерилизатором) из той же партии, что и тест-индикатор, следует инкубировать с тестовым БИ. Контрольный БИ должен давать положительные результаты в отношении роста бактерий.

В дополнение к обычному биологическому мониторингу пользователи оборудования должны проводить биологический мониторинг:

  • Каждый раз, когда используется новый тип упаковочного материала или лотка
  • После обучения нового стерилизационного персонала
  • После ремонта стерилизатора
  • После любого изменение процедур загрузки стерилизатора

При стерилизации имплантируемого устройства следует ли мне чаще проводить биологический мониторинг (анализ спор)?

Любой груз, содержащий имплантируемые устройства, должен контролироваться. В идеале имплантируемые изделия не следует использовать до тех пор, пока не станут известны отрицательные результаты анализов. Как отмечалось ранее, необходимо следовать указаниям производителя относительно надлежащего размещения биологического индикатора (БИ) в стерилизаторе. Контрольный БИ (не обработанный стерилизатором) из той же партии, что и тест-индикатор, следует инкубировать так же, как и тестовый БИ. Контрольный биологический индикатор должен давать положительные результаты в отношении роста бактерий.

Что делать, если результат анализа спор положительный?

Если механическое (например,например, время, температура, давление) и химические (внутренние или внешние) индикаторы указывают на то, что стерилизатор работает нормально, один положительный результат теста на споры, вероятно, не указывает на неисправность стерилизатора. Предметы, отличные от имплантируемых, не обязательно должны быть отозваны; тем не менее, операторы стерилизаторов должны немедленно повторить тест на споры, используя тот же цикл, в котором был получен положительный биологический индикатор (BI). Стерилизатор должен быть выведен из эксплуатации, а рабочие процедуры стерилизации должны быть пересмотрены, чтобы определить, может ли быть причиной ошибка оператора.

Если результат повторного теста на наличие спор отрицательный, а рабочие процедуры были правильными, то стерилизатор можно вернуть в эксплуатацию. Если результат повторного теста на наличие спор положительный, не используйте стерилизатор до тех пор, пока он не будет осмотрен или отремонтирован и повторно протестирован с помощью тестов BI в трех последовательных циклах стерилизации в пустой камере. По возможности, предметы из подозрительных партий, относящиеся к последнему отрицательному BI, должны быть отозваны, повторно завернуты и повторно стерилизованы.

Результаты биологического мониторинга и отчеты о мониторинге стерилизации должны быть зарегистрированы.

Информация о стерилизации имплантата – концепции ВНЧС

СТЕРИЛЬНОСТЬ КОМПОНЕНТОВ ИМПЛАНТАТА ВНЧС

Компоненты нижней челюсти и суставной ямки височно-нижнечелюстного сустава упакованы в двойные пакеты Tyvek/пленка и были стерилизованы с использованием газового цикла с этиленоксидом, который, как было показано, дает окончательно стерильный продукт с уровнем гарантии стерильности 10-6 и остаточными уровнями ниже ANSI/ Ограничения AIMI/ISO 10993-7 и ограничения, предложенные FDA.

НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ КОМПОНЕНТЫ В ОТКРЫТОЙ ИЛИ ПОВРЕЖДЕННОЙ УПАКОВКЕ.

ИНСТРУКЦИИ ПО ПОВТОРНОЙ СТЕРИЛИЗАЦИИ КОМПОНЕНТОВ ИМПЛАНТАТА ВНЧС

В случае необходимости повторной стерилизации компонента имплантата ВНЧС его можно вернуть в компанию TMJ Concepts для переупаковки и повторной стерилизации.

В качестве альтернативы чистые компоненты имплантата ВНЧС могут быть переупакованы в двойные пакеты Tyvek/пленка или бумага/пленка в соответствии со стандартной больничной практикой и повторно стерилизованы с использованием одного из перечисленных ниже газовых циклов оксида этилена (ЭО). Компоненты рекомендуется обрабатывать сами по себе, без других продуктов в стерилизационной камере.Клиент несет ответственность за демонстрацию пригодности используемого цикла стерилизации, если он отличается от перечисленных.

пустой
Концентрация газа:
Температура:
Время воздействия:
Влажность:
Промывка воздуха:
Аэрация:

Газовый цикл 100% ЭО
775 мг/л ± 10%
130 ± 5°F (55 ± 3°C)
1 час ± 2 минуты
От 30% до 80% относительной влажности
30 минут
Минимум 12 часов
при 130 ± 5°F

Цикл газовой смеси ЭО
600 ± 50 мг/л
130 ± 5°F (55 ± 3°C)
4 часа ± 15 минут
От 30% до 80% относительной влажности
3 цикла
Минимум 12 часов
при 130489 ± 5°F

 
Было показано, что эти циклы производят окончательно стерильный продукт с уровнем гарантии стерильности 10 6 и остаточными уровнями ниже пределов ANSI/AIMI/ISO 10993-7 и предложенных FDA пределов при использовании на чистых компонентах имплантатов ВНЧС.

НЕ СТЕРИЛИЗУЙТЕ ПОВТОРНО КОМПОНЕНТЫ, КОТОРЫЕ БЫЛИ ИМПЛАНТИРОВАНЫ ИЛИ ЗАГРЯЗНИЛИ МУСОРАМИ, ОСТАТКАМИ ИЛИ ЖИДКОСТЯМИ ТЕЛА. В ЭТИХ СЛУЧАЯХ КОМПОНЕНТЫ СЛЕДУЕТ ВОЗВРАТИТЬСЯ К КОНЦЕПЦИЯМ ВНЧС.

НЕ СТЕРИЛИЗИРУЙТЕ ПАРОМ КОМПОНЕНТ ШАНКОВОЙ ЯМКИ, ТАК КАК МОЖЕТ ПОВРЕДИТЬ ПЛАСТМАССОВУЮ ЧАСТЬ.

ИНСТРУКЦИЯ ПО СТЕРИЛИЗАЦИИ ВИНТОВ

Винты предназначены для стерилизации паром в футляре для стерилизации оборудования для фиксации ВНЧС, предоставленном TMJ Concepts.Было показано, что следующий цикл стерилизации дает окончательно стерильный продукт с уровнем гарантии стерильности 10-6. Можно использовать и другие подобные паровые циклы, но они не оценивались.

Предварительная вакуумная стерилизация паром в упаковке или без упаковки,
15 минут при 270–275°F (133–135°C)

Лабораторные методы

Лабораторные методы

Часть G: Методы и материалы

Лабораторные методы

А. Стерильные методы

Стерильная техника всегда относительная вещь. Необходимые меры предосторожности зависят от
экспериментальная ситуация, в том числе используемые питательные среды, конкурентные способности
экспериментальный организм, продолжительность эксперимента и предполагаемое использование культуры. Для
В этих экспериментах наиболее серьезной проблемой загрязнения является плесень. Многие распространенные плесени растут
хорошо на дрожжевых средах и эффективно конкурируют, зарастая чашками и скрывая эти дрожжи
которым удается расти.Бактерии представляют меньшую проблему, так как большинство из них плохо растут на
эти среды и при небольшом опыте можно легко отличить их от дрожжей. Другие штаммы
дрожжи могут быть катастрофическими загрязнителями, если они остаются незамеченными. В частности, красные дрожжи, которые
иногда может сбивать с толку, но отличается от наших красных дрожжей тем, что
не требует аденина.

Однако, в отличие от краткосрочных экспериментов, стерилизация сред должна быть весьма строгой.
потому что хранение дает достаточно времени для развития даже медленно растущих загрязнителей.У нас есть
пришли к выводу из опыта, что хранение сред на холоде на самом деле контрпродуктивно. Оно делает
не предотвращает заражение, но замедляет его рост. Следовательно, загрязнение может остаться незамеченным.
до инкубации культур. Гораздо лучше хранить среду при комнатной температуре и обнаруживать
загрязнения до использования среды.

(1) Стерилизация влажным теплом

Влажное тепло, создаваемое автоклавом или скороваркой, является эффективным способом стерилизации.
большинство материалов.При давлении на 15 фунтов на квадратный дюйм выше атмосферного давление воды достигает температуры
примерно 121°С до кипения. Большинство материалов эффективно стерилизуются за 15 минут.
воздействия этой температуры. Если автоклава нет, можно использовать обычный бытовой пресс.
Cooker эффективно стерилизует питательные среды небольшими партиями.

(2) Стерилизация сухим жаром

Сухие материалы, такие как стекло и металл, можно стерилизовать в печи, но для этого требуется более высокая температура.
температура (160°С) и более длительное время (не менее 2 часов), чем в автоклаве.Это наиболее практично
для стеклянной посуды, когда имеется духовка, управляемая автоматическим таймером, так что стерилизация и
охлаждение может произойти ночью. Использование одноразовой, предварительно стерилизованной пластиковой посуды снижает потребность в духовке.
важный.

(3) Стерилизация пламенем

Пламя газовой горелки эффективно стерилизует небольшие стеклянные или металлические предметы, такие как
инокуляции петель, но следует избегать «поджаривания» дрожжей при контакте с предметами, нагретыми в пламени.Окуните шпатели в спирт, а затем используйте пламя, чтобы поджечь спирт. Разместите металлические инструменты, такие
как петли в пламени, пока они не раскалятся докрасна. Охладить горячие инструменты, прикоснувшись ими к агару или внутрь
из стерильной стеклянной трубки. Однако, поскольку пламя опасно, этот метод можно и нужно использовать.
по возможности избегать. Мы обнаружили, что сжигание действительно необходимо только для стерилизации
прививочные петли и мелкие инструменты. Мы не смогли продемонстрировать какую-либо ценность в
поджигание отверстий пробирок, бутылок или колб в этих экспериментах.

(4) Стерилизация спиртом

Во многих экспериментальных процедурах наиболее эффективным способом стерилизации предметов является
этиловый спирт. Либо 95%, либо 70% будут работать. Последнее на самом деле более эффективно, но первое
зачастую удобнее. Конечно, спирту нужно дать испариться или сгореть.
перед использованием объекта в контакте с дрожжами. Используйте пламя, чтобы сжечь алкоголь, свечу
как правило, дешевле и безопаснее, чем газовая горелка.Алкоголь больше, чем тепло, делает
стерилизации, поэтому просто «зажгите» спирт, чтобы минимизировать нагрев и ускорить процесс. Также протрите
стол со спиртом перед началом эксперимента по удалению пыли с плесенью, наиболее
распространенный источник загрязнения. Если ваша кожа не особенно чувствительна, протрите руки
небольшое количество алкоголя тоже.

(5) Сохранение стерильности вещей

Наиболее распространенными источниками загрязнения во время эксперимента являются пыль,
настольные, с воздуха и от людей.Это диктует несколько очевидных принципов:
1) Сохраняйте
вещи максимально раскрыты.
2) Не прикасайтесь ни к чему, с чем может соприкасаться
культуры, и если вы прикасаетесь к ней, стерилизуйте ее снова перед использованием.
3) Протрите поверхность
вокруг эксперимента с алкоголем и минимизировать турбулентность воздуха.
4) Избегать разговоров, пения,
свист, кашель или чихание в сторону вещей, которые должны быть стерильными. Длинные волосы, если нет
связаны сзади, могут быть источником заражения.
5) Обеспечить подходящее место для подготовки,
хранение и использование стерильных сред. К сожалению, комнатные растения, животные и другие материалы, такие как
Среда дрозофилы, обычно встречающаяся в кабинетах биологии, является обильным источником плесени и
следует держать подальше от зоны, используемой для стерильных процедур.

(6) Изучите свое загрязнение, чтобы избежать его в следующий раз
Время

Если некоторые из ваших чашек с агаром загрязнились, вы часто можете это определить, изучив их.
табличка, как произошло заражение.Если загрязнители проникли в агар,
загрязняющее вещество, вероятно, было вылито со средой. Если загрязнение находится под агаром,
мог находиться в блюде до того, как его налили, или попасть внутрь, когда крышку открывали, чтобы
налить. Если загрязнение находится сверху, оно могло попасть до того, как крышка была закрыта после заливки,
открывая крышку для удаления конденсата или пока пластина
подвергается прививке.

(7) Адаптируйте свои методы к вашим
Потребности

Соответствующая стерильная техника необходима для успешных микробиологических экспериментов, но
чрезмерные меры предосторожности могут серьезно отвлечь внимание.Дрожжи и бактерии требуют разных методов
из культуры тканей. Дрожжи быстро растут, опережая большинство дрожжей, кроме нескольких нитевидных.
(нечеткие) грибы и некоторые бактерии. Эксперименты могут быть загрязнены и все еще не потеряны, когда
студенты используют дрожжи, потому что дрожжи будут расти достаточно хорошо, несмотря на загрязнение, что
результаты эксперимента можно прочитать через нарушающий рост. Поэтому используйте максимально
осторожность при изготовлении и заливке среды.

Д.Среда роста

В большинстве экспериментов, описанных в этом руководстве, используются один или два из следующих типов среды:

1) питательно полноценная среда, содержащая субоптимальное количество аденина (ДАД),

2) питательно полноценная среда, содержащая избыток аденина (YEAD),
3) а
среда определенного химического состава без аденина (MV),
4) среда определенного химического состава с
аденин (MV + Ade),
5) среда для спорообразования (YEKAC),
6) среда, используемая для
определить мелкие мутанты (PETITE) и
7) богатую среду, используемую для хранения штаммов дрожжей (YEPAD).

Мы используем среды, приготовленные из коммерчески доступных ингредиентов. Небольшие дополнительные расходы
этих ингредиентов более чем компенсируется их однородностью и надежностью. То
экономия, которую можно получить за счет использования «домашних» ингредиентов, меньше, чем можно было бы ожидать.
потому что мы еще не нашли замену самому дорогому ингредиенту, агару. Несмотря на то что
общие источники, такие как различные виды овощных соков, могут поставлять большую часть других
ингредиенты, мы пришли к выводу, что жертва воспроизводимостью является неоправданной.

Среда YED (дрожжевой экстракт + декстроза) будет нашей стандартной питательной средой. Это называется
«сложная» среда, потому что она сделана из натуральных ингредиентов (дрожжей) и ее точного химического состава.
состав не известен. Он содержит все, что есть в дрожжах, включая, конечно, аденин.
это также «полный» носитель. Мутанты, нуждающиеся в красном аденине, хорошо растут на этой среде.
вырабатывают характерный красный пигмент.

Среда YEAD (дрожжевой экстракт + аденин + декстроза) содержит те же ингредиенты, что и среда YED, но
добавлен избыток аденина.Мутанты, нуждающиеся в красном аденине, хорошо растут на этой среде, и будут
не
развивают характерный красный пигмент.

Среда YEPAD (дрожжевой экстракт + пептон + аденин + декстроза) содержит те же ингредиенты.
как YEAD, но с добавлением пептона. Это очень богатая среда, используемая для хранения штаммов дрожжей.

Среда MV (минимальная плюс витамины) представляет собой среду с определенным химическим составом, то есть она состоит из
минимум чистых химических ингредиентов, необходимых для поддержания роста дрожжей дикого типа.Мы
будет использовать MV, когда нам понадобится среда, не содержащая аденина.

Среда MV + Ade (минимальный плюс витамины + аденин) содержит те же ингредиенты, что и MV, но
добавлен избыток аденина.

YEKAC (дрожжевой экстракт плюс ацетат калия) индуцирует образование спор диплоидных дрожжей и образование спор.
проходят мейоза. Он несбалансирован по питанию, поэтому рост будет очень незначительным.

Среда PETITE содержит глицерин в качестве источника углерода и используется для выявления мелких колоний.
мутанты.Мелкие клетки не будут расти на этой среде.

Рецепты агаровых сред для выращивания

Если вы используете расфасованную смесь, следуйте инструкциям на упаковке. Если ты
Для взвешивания сухих ингредиентов используйте следующие рецепты. Даны рецепты приготовления
100 миллилитров. Если вы хотите сделать больше, просто умножьте суммы, чтобы получить нужный вам объем.
хочу. Пример: чтобы сделать 500 миллилитров, умножьте каждый ингредиент на 5.Не ставьте больше 600
миллилитров в колбе на 1000 мл. Если вы наполните контейнеры слишком полными, они могут выкипеть во время приготовления.
процесс стерилизации. Для заливки одной стандартной 100-кратной заливки требуется примерно 25 миллилитров среды.
пластина 15 мм. (Жидкие среды можно приготовить по этим рецептам, исключив агар. )

Декстрозная среда с дрожжевым экстрактом (YED):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Среда дрожжевого экстракта с аденином и декстрозой
(ДА):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
8 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

Дрожжевой экстракт Пептон Аденин Декстроза Среда
(ЕПАД):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма пептона
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
8 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

ПЕТИТ Средний:

1 грамм дрожжевого экстракта
0. 025 грамм безводной декстрозы (глюкозы)
2,4 мл глицерина
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
98 мл воды

Минимальный с витаминами (MV):

0,15 грамма Yeast Nitrogen Base без аминокислот и сульфата аммония
0,52 г сульфата аммония
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Минимальный носитель плюс аденин (MV + ade):

0.15 грамм дрожжевой азотной основы без аминокислот и сульфата аммония
0,52 г сульфата аммония
2,0 г безводной декстрозы (глюкозы)
2,0 г Агар (агар-агар; гуммиагар)
8,0 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

Среда для спорообразования (YEKAC):

1 грамм ацетата калия
0.25 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Стандартный раствор аденина

400 мг аденина в 400 мл воды (1 мг/мл)
Хранить при комнатной температуре.
Используйте 2 мл маточного раствора на 100 мл среды; уменьшить воду
добавляют в среду по 2 мл.

Диски для промокательной бумаги с аденином

1.25 грамм аденина
150 мл дистиллированной воды
художественные промокательные бумажные диски
Добавьте аденин в дистиллированную воду в достаточно большом стакане, чтобы раствор не закипел.
над. Кипятить пять минут. Добавьте диски промокательной бумаги и кипятите еще пять минут. Извлеките диски
стерильными щипцами в стерильную закрытую емкость, например чашку Петри. Поместите их в один слой
и дайте им высохнуть в течение нескольких дней.

Э.Стерильная вода

Во многих краткосрочных экспериментах воду можно «стерилизовать» кипячением.

1) поместите воду в неплотно накрытую емкость,
2) поместите емкость в кастрюлю с
кипятка в течение 15 минут,
3) после остывания закройте емкость для воды крышкой.

Вероятно, лучший способ приготовить стерильную воду — это поставить
контейнеры в автоклаве или скороварке, а затем стерилизовать воду под тем же
Условия, используемые для питательных сред.

F. Температура инкубации и скорость роста

Оптимальная температура роста для этих штаммов составляет примерно 30°С, но они
вполне удовлетворительно растут в гораздо более широком диапазоне. Все эти опыты можно провести за
комфортная комнатная температура, но дрожжи переносят почти любую температуру, которую могут люди.
Однако температура влияет на скорость роста. При более низких температурах клетки будут расти.
медленнее, и скорость должна быть определена опытным путем.Инкубационный период оценивается в
эти эксперименты основаны на инкубации при температуре в пределах одного или двух градусов от 30°С.

На самом деле можно замедлить дрожжи, охладив их, чтобы эксперименты соответствовали классу.
расписания. Просто охладите или просто охладите чашки на разных стадиях, чтобы замедлить рост.
Имейте в виду, однако, что после того, как культура была помещена в холодильник, может наступить лаг-период.
несколько часов, прежде чем он снова начнет расти. Конечно, если он достиг стационарной фазы,
не будет расти дальше ни при какой температуре.

Штаммы дрожжей действительно могут храниться длительное время в холодильнике при
температуры чуть выше нуля. Некоторые штаммы будут продолжать расти, хотя и очень медленно, в
этих температурах, но большинство из них остаются жизнеспособными в течение недель или месяцев, а некоторые — в течение многих лет.

Следует избегать температур выше 30°С. Хотя клетки будут расти при более высоких
температуры, они накапливают нежелательные petite мутации, и спороношение сильно подавляется.Красный пигмент у адениновых мутантов также ингибируется при более высоких температурах. Безопаснее всего
инкубируйте культуры, которые спорулируются при комфортной комнатной температуре.

Инкубируйте культуры в темноте или при слабом освещении, насколько это возможно.
удобный. Хотя и не критично, длительное пребывание в обычном помещении
свет или более яркий свет снизит жизнеспособность клеток, которые
содержат красный пигмент. Чувствительный к УФ штамм G948-1C/U не должен
подвергаться длительному воздействию источников света.

Для оптимального роста и развития красного пигмента пластины должны быть аэробными. Мы
инкубируйте чашки в открытых пластиковых мешках для хранения пищевых продуктов. Достаточное количество кислорода доступно при открытых мешках
для поддержки аэробного дыхания. Пластиковые пакеты предохраняют тарелки от слишком быстрого высыхания, защищают их
от загрязнения и сделать их легче носить с собой, не проливая.

G. Использование зубочисток и инокуляционных петель

Для большинства целей самый простой способ переместить дрожжи из одного места в другое на агаре.
среду стерильной зубочисткой.Плоская зубочистка удобнее в использовании, чем круглая.
Заостренный конец удобен для отбора образцов из отдельных колоний или для нанесения небольших пятен.
или полосы. Плоский конец удобен для разбрасывания дрожжей, для выделения отдельных дрожжей.
колонии и для смешивания. Зубочистки стерильны прямо из коробки, если коробка не
был загрязнен. Просто обрежьте один угол, чтобы сделать небольшое отверстие (от 1/4 до 1/2 дюйма в поперечнике).
а коробка будет служить дозатором.Зубочистки в коробке направлены в обе стороны, но
вы можете легко выбрать конец, который вы предпочитаете для любой задачи. Конечно, нужно позаботиться об обращении
каждую зубочистку только за тот конец, который не будет касаться дрожжей или среды.

Зубочистка является альтернативой традиционной инокуляционной петле, которая доступна
коммерчески, даже в платине. Мы делаем свои собственные прививочные петли из 6-8-дюймового куска
латунный стержень (используемый для пайки) и нихромовая проволока.Просверлите небольшое отверстие рядом с концом стержня, чтобы
закрепите проволоку, вставьте конец проволоки в отверстие, оберните несколько витков вокруг стержня и
оставьте дюйм или два провода прямо. В конце прямого участка сформируйте петлю с парой
острогубцы. Подожгите проволоку на бунзеновской горелке, пока она не загорится красным, чтобы стерилизовать ее перед каждым
используйте и, конечно же, дайте ему остыть, прежде чем он коснется (или поджарит) дрожжи. Прикосновение к агару
сразу охлаждает.

ЧАС.Распространяющиеся клетки

Существует несколько способов распространения клеток. Они используют различные типы пипеточного оборудования и
различные способы перемещения клеток по поверхности агара.
Количественный метод заливки
Этот метод требует подготовки отдельной пробирки для окончательного разведения для каждого планшета и
затем все содержимое пробирки выливают на поверхность агара. Этот метод имеет
Преимущество в том, что не требуется использование пламени.У него есть недостаток в том, что он не такой
воспроизводимый.

1. Сделайте серию разведений суспензии дрожжевых клеток от 1 до 10.
2. Пипеткой внесите 0,1 мл соответствующей суспензии в стерильную пробирку, содержащую 0,9 мл
стерильная вода. Вращайте пробирку, чтобы подвесить клетки, а затем вылейте все содержимое
пробирку на поверхность агаровой среды. Наклоняйте и вращайте пластину, чтобы равномерно
распределить суспензию по поверхности агара.
3. Если есть пятна, которые не покрываются, используйте стерильную зубочистку, чтобы распределить
подвеска над непокрытыми участками.

Суспензия должна быть пропитана агаром до того, как чашки будут подвергнуты воздействию
экспериментальное лечение. Чтобы ускорить процесс, заварите чашки с агаром на несколько дней.
заранее и дайте им немного подсохнуть, прежде чем вылить дрожжевую суспензию.

Видеораздел Серийное разбавление и подсчет жизнеспособных клеток иллюстрирует метод заливки.

Метод количественного распределения
Если вам нужны точные данные, лучше использовать альтернативный метод покрытия. Сотовый
суспензию аккуратно пипеткой наносят на поверхность агара, а затем распределяют стерильным
разбрасыватель. Есть два типа разбрасывателей:

Разбрасыватель скрепок без пламени
Вы можете легко сделать недорогой многоразовый разбрасыватель, выпрямив два изгиба в большом
канцелярская скрепка, оставив конец в виде шпильки для расправления и прямую ручку под прямым углом к ​​нему.Вы можете стерилизовать несколько шпателей вместе в закрытых стаканах или завернуть их в фольгу или бумагу.
Разбрасыватель пламенного стекла
Если у вас есть оборудование и навыки работы со стеклянной палочкой, вы можете сделать простой разбрасыватель стекла.
нагревая и сгибая один дюйм секции на конце короткого куска стеклянного стержня. Эти
также можно приобрести разбрасыватели.

1. Сделайте серию разведений суспензии дрожжевых клеток от 1 до 10.
2. Используйте новый наконечник для пипетки, чтобы набрать 0.1 мл соответствующей суспензии на агар
поверхность. Ударьте пробирку перед взятием пробы. Если вы делаете несколько тарелок
вы можете пипетировать клетки в каждый планшет, используя один и тот же наконечник пипетки, а затем распределять их
без воспламенения распределителя между каждой плитой.
3. Стерилизуйте шпатель в 95% этаноле, а затем пропустите шпатель через пламя до
поджечь спирт. Аккуратно держите шпатель, пока весь спирт на шпателе не
полностью сгорает.Использование спиртового пламени является опасным шагом и требует осторожности
и строгий контроль со стороны учителя.
4. Охладите шпатель, коснувшись им агара. Используйте плоскую сторону, чтобы распределить
подвеска над поверхностью; затем используйте изогнутую часть шпателя, чтобы сделать
перекрывающиеся штрихи. Поверните тарелку на 90 градусов и повторите процесс приготовления
перекрывающиеся штрихи. Крышку можно держать над планшетом, чтобы свести к минимуму загрязнение.
Избегайте распределения суспензии по краям, где она может стекать между агаром.
и сторона чашки Петри.

В видеоразделе «Использование дрожжей для измерения солнечного УФ-излучения» показано покрытие распределителя из обожженного стекла.
метод.

Качественный метод заливки для получения газонов из клеток
Этот метод дает толстый равномерный рост клеток (газон) на поверхности агара.
пластина. Это быстрый метод, который полезен для различных качественных экспериментов.

1. Сделать мутную взвесь дрожжевых клеток.
2.Пипеткой нанесите 1,0 мл суспензии на поверхность агаровой среды. Наклоняйте и вращайте
чашку для равномерного распределения суспензии по поверхности агара.
3. Если есть пятна, которые не покрываются, используйте стерильную зубочистку, чтобы распределить
подвеска над непокрытыми участками.

Как и в количественном методе заливки, суспензия должна быть пропитана влагой.
агара до того, как чашки будут подвергнуты экспериментальной обработке.Если вы делаете пластины с агаром
за несколько дней и дайте им немного подсохнуть, прежде чем вылить дрожжевую суспензию, которую вы
ускорить процесс.

Видеораздел Влияние солнечного УФ на клетки иллюстрирует метод заливки покрытия для
лужайка.

I. Автоматические микропипетки, серологические пипетки и
Одноразовые пипетки с грушей

Автоматические пипетки — это рабочие лошадки современной молекулярной биологии.
микробиология.Они быстрые и точные и экономят много времени и нервов. То
эксперименты в этом руководстве часто требуют использования пипетки на 0,1 мл. Хотя они относительно
дорогие, они делают работу так быстро, что ее легко могут разделить несколько студентов или лабораторий.
группы. Вы будете использовать его для серийных разведений и для посева клеток на агар. Стерильные советы
упакованы в многоразовые пластиковые диспенсеры. Практикуйте использование пипетки с водой, пока не почувствуете
удобно с этим.(Если автоматические микропипетки недоступны, их можно заменить
одноразовые грушевидные пипетки, серологические пипетки или градуированные капиллярные трубки)

1. Плотно прижмите узкий конец пипетки к открытому концу наконечника, пока наконечник
еще в дозаторе.

2. Чтобы заполнить его, медленно нажимайте на поршень до тех пор, пока не почувствуете сопротивление, но не до упора.
возможно. Погрузите наконечник в раствор, а затем медленно отпустите поршень.Если
если капли прилипнут к наконечнику, протрите их о край контейнера.

3. Поместите наконечник в жидкость в пробирке, в которую вы пипетируете, и медленно нажмите
поршень. На этот раз нажмите на нее как можно сильнее, чтобы удалить весь образец.
Удалите наконечник пипетки из раствора, отпустите поршень и выбросьте
наконечник.

Вместо автоматических пипеток можно использовать серологические пипетки и пипеточные насосы.Эти
пипец даст очень точные измерения объема. Возможно приобрести предварительно стерилизованное
серологические пипетки нескольких размеров. У вас должен быть набор пипеточных насосов, чтобы учащиеся могли
использовать с этими пипетками. Помните, что никогда не рекомендуется набирать жидкость ртом в рот.
пипетка Нет даже стерильной воды!

Одноразовые пипетки с грушей также подходят для большинства экспериментов, описанных в этом руководстве.
Три капли из пипетки с грушей на один миллилитр примерно равны 0.1 мл. Громкость
измерения не такие точные, но эти пипетки дешевы и не требуют использования пипеток
насосы. Эти пипетки также можно приобрести предварительно стерилизованными и в индивидуальной упаковке. То
обертки предварительно стерилизованных пипеток обеспечивают удобный стерильный держатель пипетки во время
Экспериментальная процедура.

J. Создание субкультуры дрожжей

Питательные вещества для дрожжей могут поставляться в виде твердой или жидкой среды.Когда дрожжи напрягаются
поступают от поставщика, они обычно растут на скошенном агаре. Если вы держите эти наклоны плотно
закрытые и охлажденные вы можете хранить их до одного года. Небольшие наклоны позволяют использовать
зубочистки для перемещения дрожжей. Лучше всего иметь свежие культуры для экспериментов. Итак, день
перед тем, как вы собираетесь использовать дрожжи, перенесите небольшое количество клеток из исходной культуры в свежую
средний (обычно YED). Для переноса клеток можно использовать обожженную петлю, но можно использовать стерильную зубочистку.
обычно проще.Прикоснитесь зубочисткой к ячейкам в наклоне; вам не нужно передавать много ячеек.
Сделать штрих из клеток на поверхности агара; постарайтесь не поцарапать поверхность агара. Этот
Процедура выращивания свежих дрожжей называется пересевом. Вы должны пересев не менее 12 часов
прежде чем вы собираетесь использовать дрожжи.

Иногда культуры отправляются из центров хранения дрожжей на молочных бумагах. Чтобы сделать свежий
пересев: стерильно откройте фольгу и с помощью стерильных щипцов поместите небольшой квадрат молочной бумаги
на стерильной чашке с агаром YED.Если несколько раз протереть бумагой агар, должно получиться
использовать отдельные колонии, и на месте размещения бумаги вырастет большое пятно клеток. Это займет
от 3 до 5 дней для многих штаммов, культивируемых таким образом, чтобы вырасти до подходящего размера. Культуры отправлены
Таким образом, они менее уязвимы к неблагоприятным погодным условиям и длительному времени в пути.

K. Изоляция одиночных колоний

Многие эксперименты требуют выращивания колоний из изолированных одиночных клеток.Это легко
Высеивают культуры штрихом на чашку с агаром с помощью плоского конца зубочистки. То
Цель метода состоит в том, чтобы развести клетки на поверхности агара последовательными, перекрывающимися
полосами, пока отдельные клетки не разделятся или не распределятся с образованием изолированных одиночных колоний. Фигура
11>ниже показана техника, которую вы должны практиковать, пока не овладеете ею.

Рисунок 11: Изоляция одиночных колоний

Первым шагом является
сделайте одну короткую полоску клеток (длиной около 2 см) у края агара в чашке Петри.Свежей зубочисткой сделайте вторую полосу внахлест под углом примерно 15 градусов к
первый, перетаскивая ячейки с первой полосы на
свежий агар. Сделайте еще несколько параллельных полос с
та самая зубочистка. Затем возьмите новую зубочистку и
повторить процесс, начиная с конца последнего
полоса. Повторяйте эту последовательность, пока вся пластина не
был покрыт. Поскольку популяция клеток,
производится из одного
родительская клетка является клоном, это процесс клонирования
дрожжи.Если культура не является чистой по какой-либо причине,
это обеспечивает метод выделения чистых клонов. То
Тот же результат может быть достигнут с помощью пламенного и
охлаждаемая петля на каждом шагу, где находится свежая зубочистка
использовал. Этот подход медленнее и рискует поджарить
клетки.

Л. Реплика
Покрытие

В некоторых экспериментах мы переносим
многие культуры из одного вида среды
к одному или нескольким другим видам, к
определяют рост культур
требования.Это можно сделать с помощью
зубочистки или петли, но если их очень
много штаммов, которые нужно перенести, становится
трудоемкий. Простой и быстрый метод —
покрытие реплик — сыграло важную роль в
развитие микробной генетики
и является одним из величайших средств экономии труда всех
время. Эксперименты, описанные ниже
можно обойтись и без этой техники, но
это увлекательно и стоит
проблема его настроить. Даже при скромных
эксперименты, старания хорошие
инвестиции в долгосрочной перспективе.

Принцип репликации покрытия заключается в следующем.
что резиновый штамп.

Рисунок
13: Реплика покрытия

Штамп из хлопкового вельвета используется для штамповки копии рисунка.
клеток, растущих на одной чашке, на одну или несколько других чашек. Аппарат состоит из
цилиндрический держатель для вельвета, размер которого идеально подходит для размещения на дне чашки Петри.
тарелка и какое-то кольцо, чтобы удерживать вельвет на месте. Для стандартных пластиковых тарелок диаметром 10 см
соответствующий диаметр составляет приблизительно 3.3 дюйма. Держатель может представлять собой цилиндр из дерева, металла,
пластик или любой другой материал, который вы можете изготовить. Это может быть даже пищевая банка весом в один фунт или что-то другое.
тяжелый цилиндрический контейнер, если дно плоское. (Круг, вырезанный из пенопластового лотка для мяса,
плоская поверхность, чтобы положить на банку с едой) Кольцо для удержания вельвета может быть большим зажимом для шланга, некоторые
другой найденный предмет или даже большая резинка.

Вельвет, конечно, нужно стерилизовать, а свежескроенный хлопковый вельвет обычно нуждается в стерилизации.
перед стерилизацией необходимо удалить ворсинки с помощью кусочка малярной ленты.Автоклавируйте и высушите его
тщательно. Мы используем шестидюймовые квадраты, которые складываем и заворачиваем в бумагу, автоклавируем, а затем сушим
на настройке вакуума. Если автоклав недоступен, высушите их в теплой духовке или просто дайте им
сидеть на прилавке, пока они не высохнут. Чтобы повторно использовать вельветовые квадраты, промойте их в простой воде и
повторно стерилизовать. Вместо хлопка можно использовать другие ткани, такие как несколько слоев хлопчатобумажной марли.
вельвет.

Чтобы создать копию пластины, переверните мастер-пластинку с дрожжами на вельвет на
держатель и плотно прижмите пластину к стерильной поверхности ткани.Затем медленно снимите тарелку
выключается, оставляя копию или отпечаток клеточного рисунка на вельвете. Перенести реплику на
вельвета на одну или несколько стерильных пластин, осторожно прижимая каждую пластину к вельвету и
вытащить его. С одной мастер-пластины можно сделать до 20 копий, если
необходимо. Процедура показана на рисунке 13.

То, как вы снимаете тарелку с вельвета, определяет количество
дрожжи переносятся с вельвета на тарелку или с тарелки на вельвет.Если вы очистите мастер-пластину
с вельвета медленным, перекатывающим движением, на бархате останется больше дрожжей, чем если бы вы
это с быстрым вертикальным движением. Желательно перенести как можно меньше клеток и при этом быть
возможность увидеть отпечаток клеток на реплике пластины.

M. Оценка количества дрожжевых клеток в
Культура

Существует много способов непосредственного подсчета клеток, наиболее распространенный из которых использует подсчет клеток.
камеры для микроскопа или электронные счетчики частиц.Они имеют мало поучительного значения в
генетики и не подходят для общего использования в классе. Поэтому мы разработали
эксперименты, которые не зависят от точного подсчета частиц. Когда необходим подсчет клеток, мы
определите их по количеству колоний на чашках (см. Разбавление и посев
Процедуры
).

Однако многие эксперименты требуют приблизительных оценок числа
клеток в жидкой суспензии, чтобы получить достаточное количество посевных колоний.Для этого вы
будет использовать один из самых сложных и чувствительных оптических инструментов: человеческий
глаз. С удивительно небольшой практикой вы можете научиться оценивать количество клеток в суспензии.
просто глядя на это.

Визуальная оценка плотности клеток основана на достаточно резком пороге наблюдения глаз.
мутность. При осмотре в стандартной пробирке 13 х 100 мм дрожжевые суспензии менее примерно 1
млн клеток на мл визуально не мутные. Выше этой пороговой плотности они заметно облачны. К
регулируя количество клеток в суспензии до едва заметного, можно получить суспензию
известной плотности (примерно 1 х 106 клеток/мл), а затем использовать серийные разведения для получения других
концентрации. (См. также эксперимент Серийные разведения и подсчет жизнеспособных клеток )

Материалы:

  • Стерильные, закрытые 13 культуральных пробирок по 100 мл.
  • Стерильная вода
  • Стерильные пипетки на 1 мл (одноразовые пипетки с грушей или серологические пипетки
    и пипеточный насос)
  • Микропипетка и стерильные наконечники (дополнительно)

Процедура:
а.Поместите 1-2 мл стерильной воды в пробирку.

б. Используйте охлажденную, нагретую петлю для посева или стерильную зубочистку, чтобы подвесить небольшой
количество дрожжей размером с булавочную головку в воде.

в. Тщательно перемешайте суспензию, свободно удерживая пробирку за ее верхнюю часть.
между большим и указательным пальцами и постукивая по нему снизу
ладонью одного или нескольких пальцев другой руки, создавая завихрение
движение.(Ударное движение напоминает жест, который можно было бы сделать, чтобы
поманить кого-нибудь сюда.)

Эта суспензия должна содержать примерно 1 х 107 клеток/мл, но это
плотность трудно судить, поэтому мы разбавим его, прежде чем судить о его
плотность.

д. С помощью стерильной пипетки на 1,0 мл внесите 0,9 мл стерильной воды в пробирку.

е. Разбавить 0.В эту пробирку налейте 1 мл вашей клеточной суспензии и ударьте по ней. Сравните это
трубкой со стерильной водой. Если пробирка с клетками едва мутная,
тогда он содержит почти 1 х 106 клеток/мл.

ф. Если пробирка визуально не мутная, добавьте дополнительные объемы 0,1 мл
оригинальная подвеска пока есть. Если вы думаете, что это более мутно, чем предел
видимости, затем добавьте больше стерильной воды.Отрегулируйте объемы воды и клеток
пока не убедишь. Следите за объемами, которые вы добавляете, чтобы
знать окончательное разбавление, которое вы сделали.

N. Процедуры разбавления и посева

Во многих экспериментах необходимо распределить приблизительно известное количество клеток на пластине.
разрастаться в колонии. Используем серийные разведения, делая несколько небольших разведений одно за другим,
вместо того, чтобы сделать одно большое разбавление.Метод экономит материал и позволяет избежать использования больших
объемы, которые трудно измерить и стерилизовать.

Материалы:

  • Стерильные, закрытые 13 культуральных пробирок по 100 мл.
  • Стерильная вода
  • Стерильные пипетки на 1 мл (одноразовые пипетки с грушей или серологические пипетки и
    пипетка насос)
  • Микропипетка и стерильные наконечники (дополнительно)
  • Скрепка для бумаги или шпатель для стекла: клетки распределяются по поверхности
    агар с разбрасывателями.

Приготовление серийных разведений:
Следующая процедура дает серию разведений, которые различаются в десять раз.
Вы сможете использовать эту процедуру для большинства экспериментов, требующих последовательного
разведения (рис. 12).

Рис. 12. Посев с последовательным разведением
Стратегия

а. Приготовьте суспензию, содержащую приблизительно 1 х 106 клеток/мл в стерильной
воды, используя процедуру, описанную в Оценка количества дрожжей
Клетки в культуре.

б. Пипетка 0,9 мл стерильная
воды в каждую из трех
трубы и промаркируйте их. Мы
рекомендуем сделать
схема в тетради
показ процедуры
и смысл твоего
этикетки.

в. Ресуспензируйте клетки в
подвеска оригинал.
Отберите 0,1 мл с помощью микропипетки и свежего наконечника и перенесите его в одну из
трубки воды.Затем ударьте по трубке, чтобы подвесить клетки.

д. Повторяйте процедуру последовательно, используя новую пипетку или наконечник пипетки для каждого из
остальные пробирки, так что каждая пробирка содержит 1/10 числа клеток, как
Предыдущая. Третье разведение должно содержать примерно 1 х 103
клеток/мл.

Покрытие разведений:
Если вы ожидаете, что все клетки вырастут, то вы поместите только окончательное разведение, т. к.
другие пробирки были бы слишком концентрированными, и пластины, сделанные из них,
содержат слишком много колоний для подсчета.Однако в экспериментах с излучением вы
используйте разведения, содержащие больше клеток, чтобы компенсировать уменьшенное количество клеток
которые выдерживают облучение. Таким образом вы получите оптимальное количество колоний для
количество на каждой чашке, даже когда большинство клеток мертвы.

е. У вас будут лучшие данные, если вы сделаете все покрытия в двух или трех экземплярах. Первый
пометьте пластины маркером (Pilot SC-UF или Sharpie).(Ты будешь
также используйте такую ​​же ручку для маркировки колоний при подсчете
их.) Мы рекомендуем идентифицировать каждую пластину номером штамма,
дозу (для радиационных экспериментов), разбавление и ваши инициалы, но вы
Вы можете предпочесть закодировать эту информацию в своих заметках и поставить кодовые буквы или
цифры на табличке. Пишите только на крышке или маленькими буквами по краю
дно, оставляя дно свободным для маркировки колоний, когда вы
посчитай их.

ф. Ресуспендируйте клетки в каждой пробирке, постукивая по ней перед взятием образца, затем
пипеткой 0,1 мл в центр каждой из дубликатов пластин. Если вы используете
разбрасыватели скрепок возьмите стерильный разбрасыватель из конверта. Если ты
с помощью шпателя вынуть из спирта, поджечь в пламени, а после
пламя погаснет, прикоснитесь им к агару одной из чашек вдали от
клетки.Распределите клетки по поверхности любым шпателем, стараясь
Держите клетки на расстоянии не менее 0,5 см от края агара. (Если вы используете
методом высева пипеткой 0,1 мл суспензии в 0,9 мл стерильной
вода. Смешайте клетки с водой. Вылейте всю смесь на агар.
поверхности, затем наклоняйте и вращайте пластину до тех пор, пока смесь не будет равномерно распределена по
поверхности агара. )

О.Микроскопическое исследование дрожжей

Самый простой способ исследовать дрожжи под микроскопом — посмотреть на них прямо на
пластина. Это работает только с маломощными объективами (10x), потому что более мощные объективы слишком
близко к агару и туману. Чтобы увидеть больше деталей, сделайте влажное слайд-препарат. Нанесите каплю воды на
предметное стекло микроскопа. Перенесите небольшое количество дрожжей в воду с помощью стерильной зубочистки и перемешайте.
немного. Затем положите покровное стекло на суспензию дрожжей на предметном стекле.Если подготовка будет
просматривается несколькими учащимися, прикрепите покровное стекло к предметному стеклу лаком для ногтей, а предметное стекло
будет доступен для просмотра в течение нескольких часов. Погружение в масло не должно быть необходимым и только для
соблюдая форму клеток, окрашивать их необязательно. При подходящих методах окрашивания
ядро можно увидеть, но хромосомы дрожжей слишком малы, чтобы их можно было увидеть при самом ярком свете.
микроскопы.

Для демонстрации в классе вы можете использовать видеомикроскоп.Есть ряд
очень хорошие видеомикроскопы, доступные на рынке. Если у вас его нет, то можно получить
многие из тех же результатов с микроскопом в классе и домашней видеокамерой. Когда мы смотрим
через микроскоп наши глаза сфокусированы на бесконечность. Если мы поместим видеокамеру рядом с
окуляр микроскопа и установив фокус камеры на бесконечность, он «увидит» то же самое, что и наш
глаза. Это помогает вырезать свет, проникающий сбоку, обернув объектив камеры и
окуляр микроскопа кусочком темной ткани или алюминиевой фольги.

P. Штаммы дрожжей

В экспериментах используются следующие штаммы:

Гаплоиды:

BSCS Фонд
Штамм № Генотип 9098 Артикул Центральный номер
HA0 a Дикий тип; будет расти на
MV
a1 XP837-S10
HB0 1 XP837-S11
HA1 a ade1 Красный, требующий аденина;
Дикий
XP300-38B
HB1 ade1 тип для ADE2 XP823-S34
HA2 Красный, требующий аденина; дикий
HAR a ade2 тип для ADE1 a2 XP832-S25
HB2, Красный, требующий аденина; дикий
HBR ade2 тип для ADE1 2 XP820-S4
HA12 a ade1 ade2 Красный, требующий аденина;
двойные
XP300-29C
HB12 ade1 ade2 мутанты XP300-40C
HAT a trp5 Белый, триптофан-
требуется
a3 XP837-S5
HBT trp5 3 XP837-S6
HART a ade2 trp5 Красный, требующий аденина, a4 XP837-S8
HBRT ade2 trp5 триптофан-требующий 4 XP837-S9
HA1L a ade1 leu2 Красный, аденин
а также
лейцин
требуется
G948-1C/U рад1 рад18 частей1 ура3 мутант в эксцизионной репарации, склонной к ошибкам репарации и
фотореактивация, требуется урацил
Диплоиды:
Штамм № Генотип Кросс
D02 a /
ade2/ADE2
HA2 x HB0
D12 a / ade1/ADE1
ade2/ADE2
HA1 x HB2

Q. Облучение дрожжей ультрафиолетом
Радиация

Стандартные бактерицидные УФ-лампы с разрядом паров ртути низкого давления.
пробирки, являются идеальным источником УФ-излучения для облучения дрожжей дикого типа нормальными ферментами репарации ДНК.Солнце или кварцево-галогенные дворовые фонари являются хорошими источниками УФ для облучения мутантных штаммов.
дрожжи с дефицитом нормальных ферментов репарации ДНК.

Стандартные бактерицидные лампы УФ-С представляют собой обычные люминесцентные лампы без люминесцентного
покрытием и с оболочкой, прозрачной для ультрафиолета. Ртуть низкого давления
спектр представляет собой линейчатый спектр с наиболее заметной линией, имеющей длину волны 253,7
нанометры. Это случайно близко к 260 нанометрам, которые оптимальны для поглощения
ДНК.

Конструкция У.В. Радиационная камера продиктована несколькими соображениями,
главное безопасность. (См. Инструкции по сборке камеры УФ-излучения )
Излучение, испускаемое бактерицидными лампами, вызывает болезненные и опасные ожоги глаз и кожи.
поэтому они должны быть эффективно защищены. Воздействие на клетки нельзя контролировать, поворачивая
лампа включается и выключается, потому что выходная мощность лампы сильно зависит от температуры.Поэтому его необходимо заключить в экранированный короб с затворным механизмом, чтобы он мог прогреться до
постоянная температура перед использованием. Дверь и ставень должны быть заблокированы, чтобы они
оба не могут быть открыты одновременно.

Порядок работы камеры УФ-излучения:

1. Подключите лампу и включите ее. Вы можете с уверенностью сказать, когда лампа
на, увидев световой индикатор.

2. Дайте лампе прогреться в течение 30 минут, если это возможно.

3. Отцентрируйте чашку Петри, которую необходимо экспонировать, по отметке на дне
коробку, снимите крышку пластины, аккуратно опустите дверцу и откройте затвор.
Измерьте время экспозиции с момента открытия затвора. Когда
время истекло, закройте затвор, аккуратно поднимите дверцу, наденьте крышку
чашку Петри и снимите ее. Слишком быстрое движение двери приводит к попаданию воздуха
турбулентность, которая может привести к загрязнению чашек с агаром.Если
коробка оснащена лампой УФ-В, такая же процедура может быть
последовал.

Процедура экспонирования с использованием солнечных или кварцево-галогенных дворовых фонарей:

1. Накройте блюдо темной бумагой и, пока оно остается закрытым,
блюдо под углом 90 градусов к источнику света. Если вы используете
кварцевая галогенная лампа снимите стеклянную крышку с лампы. В то время как
солнце и свет во дворе производят меньше УФ-излучения, чем бактерицидный
трубки, все равно следует принимать разумные меры предосторожности.Не смотрите прямо
у источника и избегайте любого длительного прямого воздействия на кожу.

ВНИМАНИЕ: Кварцевая галогенная лампа сильно нагревается. Использование этой лампы должно быть под прямым
надзор учителя.

2. Снимите темную крышку с планшета и начните измерение
время контакта. По истечении времени накройте блюдо и переместите его
к инкубатору. Обычно нет необходимости снимать крышку с
пластиковые чашки Петри при использовании солнечных или кварцевых галогенных фонарей
как источник УФ.Большинство пластиковых чашек Петри прозрачны для
длина волны ультрафиолетового излучения, создаваемого этими источниками. Вы можете запустить
пробный опыт на каждой новой партии чашек Петри. Если вы получаете
показатели выживаемости выше, чем вы ожидаете, вы можете захотеть снять веки
при воздействии УФ. Если загрязнение становится проблемой, вы можете
хотите накрыть посуду тонкой полиэтиленовой пленкой или пакетом для сэндвичей.
Эти тонкие пластиковые пленки не будут поглощать значительное количество УФ-излучения.

Нажмите здесь, чтобы вернуться

Последнее обновление: среда, 24 февраля 1999 г.

Добавить комментарий